RBM8A在乳腺癌组织中的表达及调控乳腺癌侵袭、转移机制的研究

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目的:检测核糖核酸结合基序蛋白8A(RBM8A)在乳腺癌中的表达情况,分析其与临床病理特征之间的关系,探讨其对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移、凋亡能力的影响和相关机制的研究。方法:1.采用免疫组织化学染色技术(IHC)检测98例浸润性乳腺癌组织和对照组20例正常乳腺组织中RBM8A蛋白的表达情况,并统计分析其表达水平与乳腺癌相关临床病理特征之间的相关性;2.采用WB实验检测四种细胞株(MCF-10A、MCF-7、HS-578T、SK-BR-3)中RBM8A蛋白的表达水平;3.通过RNA干扰技术构建RBM8A蛋白低表达细胞株,Q-PCR检测相对表达量,设计低表达RBM8A组(实验组A)、si-NC组(对照组B)、Untreated组(对照组C),并通过CCK-8实验、Transwell侵袭实验、划痕实验、流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、侵袭、迁移及凋亡能力;4.通过WB实验检测每组中RBM8A蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、vimentin、N-cadherin的表达情况。结果:1.IHC:RBM8A蛋白在乳腺癌组织中高表达,其表达水平与乳腺癌肿瘤直径、KI-67、组织学分级、淋巴结转移情况有相关关系,(p<0.05)。2.Western blot:四种细胞株中MCF-10A的RBM8A的相对表达量低于MCF-7、HS-578T,高于SK-BR-3,(p<0.05)。3.下调RBM8A后,低表达RBM8A实验组与其余两组对照组相比,细胞增殖、侵袭、迁移能力明显下降,凋亡细胞比例明显上升,(p<0.01)。4.与对照组相比,低表达RBM8A实验组中E-cadherin蛋白相对表达量上升,N-cadherin、vimentin蛋白相对表达量下降,(p<0.01)。结论:1.RBM8A蛋白在乳腺癌组织中高表达,并与乳腺癌的高侵袭性、转移性有相关关系;2.下调RBM8A蛋白表达可抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖,促进细胞凋亡,并可能通过EMT途径影响乳腺癌细胞侵袭和转移。
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