研究目的
　　观察慢性不可预知性温和应激(Chronic unpredictable mild stress, CUMS)肝郁脾虚证模型大鼠十二指肠NOS(nNOS、iNOS、eNOS)和Occludin基因、蛋白的表达水平，以期探讨NOS(nNOS、iNOS、eNOS)是否通过影响Occludin表达水平从而影响肠道紧密连接，进而影响肠黏膜屏障结构和功能，并探讨逍遥散对此的调节作用。
　　研究方法
　　第一部分：60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散组和氟西汀组，每组15只。适应性喂养7d之后，除正常组外，其余各组大鼠用CUMS法造模，连续42d，建立CUMS肝郁脾虚证模型大鼠。给药：每次造模40min后，除正常组外，其余各组大鼠均灌胃不同的药物。造模结束后，观察大鼠的一般情况，并运用旷场实验、糖水消耗实验对各组大鼠进行肝郁症状的评价，通过进食量、体重和大便等变化用于脾虚症状的评价。
　　第二部分：通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组大鼠十二指肠nNOS、iNOS、eNOS和Occludin的基因表达情况，并观测逍遥散对其调节作用。
　　第三部分：通过Westernblot方法检测各组大鼠十二指肠nNOS、iNOS、eNOS和Occludin的蛋白表达情况，并观测逍遥散对其调节作用。
　　研究结果
　　第一部分：(1)从宏观表征上看，随着CUMS造模时间的增加，与正常组相比，模型组大鼠逐渐出现精神抑郁，进食量明显减少(P＜0.01)体重明显减轻(P＜0.01)，大便溏而不成形，毛发干枯发黄凌乱；与模型组相比，逍遥散组和氟西汀组的精神状态尚可，有较多的自主活动，毛发色泽较好但稍微凌乱，进食量明显增加(P＜0.01)，体重增长较快(P＜0.01)，大便干湿尚可且柔软成形。(2)旷场实验：与正常组相比，模型组大鼠5min内中央区停留时间高于正常组(P＜0.01)，总穿格数、站立次数均低于正常组(P＜0.01)；与模型组相比，逍遥散组和氟西汀组大鼠中央区停留时间均减少(P＜0.01)，总穿格数和站立次数均增加(P＜0.05)。(3)糖水消耗实验：与正常组相比，模型组大鼠1h内糖水消耗率明显降低(P＜0.01)；与模型组相比，逍遥散组和氟西汀组大鼠1h内糖水消耗率明显增加(P＜0.01)。
　　第二部分：与正常组相比，模型组大鼠十二指肠nNOS和iNOS的基因表达明显升高，eNOS和Occludin的基因表达明显下降，且差异均有统计学意义(P＜0.01，P＜0.05)；与模型组相比，逍遥散组和氟西汀组大鼠十二指肠nNOS和iNOS的基因表达明显下降，eNOS和Occludin的mRNA表达上升，且差异均有统计学意义(P＜0.01)。
　　第三部分：与正常组相比，模型组大鼠十二指肠nNOS和iNOS的蛋白表达明显升高，eNOS和Occludin的蛋白表达明显下降，且差异均有统计学意义(P＜0.01)；与模型组相比，逍遥散组和氟西汀组大鼠十二指肠nNOS和iNOS的蛋白表达明显下降，eNOS和Occludin的蛋白表达明显上升，且差异均有统计学意义(P＜0.01)。
　　结论
　　(1)第一部分实验：通过42d的CUMS造模方法，成功复制肝郁脾虚证模型大鼠，从宏观表征上看逍遥散可调节大鼠的肝郁脾虚证症状。
　　(2)第二部和第三部分实验：肝郁脾虚证模型大鼠十二指肠肠道紧密连接结构和肠黏膜屏障完整性的改变与nNOS、iNOS的基因和蛋白表达水平升高、紧密连接蛋白Occludin的降低有关，且逍遥散能调节此表达差异，提示逍遥散改善肝郁脾虚证模型大鼠十二指肠肠道紧密连接和肠黏膜屏障功能的机制，可能与其降低nNOS、iNOS的表达水平、降低nNOS、iNOS对紧密连接蛋白Occludin的损伤相关。