基因多态性是普遍存在的现象，目前已知的许多细胞因子基因多态性可以导致细胞因子分泌量的高低差异。而细胞因子分泌量的变化可以直接影响免疫应答的进程，所以近年来，细胞因子基因多态性对器官移植效果的影响是器官移植一个热点。其中对免疫进程有主要影响的“关键性细胞因子”，它们的基因多态性是人们最关注的，包括TNF-α、TGF-β、INF-γ和IL-10等，而IL-10的基因多态性是其中的重要部分。 第一部分 IL-10基因多态性的检测 目的：确定52对供、受者IL-10基因多态性的分布情况。 材料和方法： 1．试验分析方法：分别取自2002年9月—2003年3月间在本中心进行首次尸体肾移植受者及其供者的外周血白细胞／脾脏淋巴细胞的DNA，供者26例，受者52例，共52对。按照相应的技术要求，提取上述供受者的DNA。采用SSP-PCR方法，对DNA标本进行IL-10基因多态性的检测、定型。 2．统计分析方法：计算各组IL-10基因多态性各个位点的二倍体基因型、单倍体基因型、表型频率。再根据IL-10基因型确定它们的单倍体高、中、低表达型及二倍体表现型表达型。统计分析两组病人中上述各频率，率的比较采用卡方检验或Fisher精确检验，统计过程应用EXCEL2000和SPSS 11.0软件。 结果： 1．全部52例肾移植受者的外周血中、26名供者的DNA均提取成功，DNA浓度均第二军医大学硕士论文达到试剂盒指定的标准。所有肾移植供者(对照组)、受者(实验组)的IL一10各个多态性位点的基因型都得到了鉴定。2.试验组与对照组均未出现高表达型和对应的基因型，(一1082、一819、一592)三个位点的各个频率在2组间均未显示有统计学区别，大部分的P值都大于0.5，但是在一1()82位点上，正常对照组为G的比率要较试验组为高且P=0.2，提示正常人与肾移植患者之问在工L一10的基因多态性上可能存在差别，在扩大样本量后，很有可能显示出统计学差异。第二部分供、受者白介素一10基因多态性对一年内肾移植效果的影响目的:观察供、受者白介素一10峡因多态性对一年内肾移植效果的影响。临床资料和方法:1.试验方案:观察对象为第一部分中进行IL一10基因多态性检测的受者，移植前未采用诱导方案，术后均采取CSA/FK506+朋F/AZA十Pred三联免疫抑制方案。记录移植后一年内患者的急性排斥事件和相关检验数据2.统计分析方法:比较不同供、受者的儿一10基因多态性及配对方式发生急性排斥(包括单次和多次排斥)的比率，推测IL一10基因多态性与排斥之间的关系。并分析已知对急性排斥发生有影响的因素(DR错配，冷缺血时间)以剔除其对试验结果的影响。应用EXCEL2000和SPSSll软件，采取student一t和卡方或fisher精确检验进行数据统计处理，约定P<0 .05为有统计学意义，P<0 .1为有统计学趋势。结果:1.共49例完成·年随访，其中有18例患者发生急性排斥反应，发生一次以上急性排斥者7例，无移植肾丢失。由于供受者均无高分泌型，共有4种供受第二军医大学硕士论文者配对方式:l一工，I一L，L一I和L一L，依次记为A一D方式。2.对于急性排斥，供者的儿一1()基因多态性和供一受者D配对方式对急性排斥的影响有统计学趋势(P<0.1)，即:供者为中分泌型者发生急性排斥的可能性较大，供受者配对方式为L一L者发生急性排斥可能性较小。3.对于发生多次(一次以上)急性排斥(multi一rejection)者，供者基因多态性及B和D配对方式对此类排斥发生有统计学意义或趋势，即:供者中分泌型和B配对方式可能促进多次排斥的发生，D配对方式可能减少此类排斥的发生。4.本组资料中，l)l(完全错配与急性排斥的关系有非常显著的统计学意义，冷缺血时间有统计学趋势。为剔除其它能影响急性排斥发生的因素对于研究的影响，全部病例分别按照“DR完全错配与否”和“冷缺血时间”这2个因素进一步分层，对前述结果中有统计学意义和趋势的几个基因多态性因素进行了考查，结果显，J几:对于全部急性排斥而言，按照DR错配和冷缺血时间分层后，全部分析结果I’>O.l:对于多次急性排斥病例而言，分层后D配对方式仍显示有统计学意义，供者中分泌型和B配对方式显示统计学趋势。讨论白介素10(IL一川)在机体的免疫应答反应中起着十分重要的作用，是关键性细胞因子之一，其分泌量的高低对兔疫进程有很大的影响。除机体的反馈调节机制外，IL一10基因多态J性对于其分泌量的影响也与移植效果密切相关。现有文献对于IL一10基因多态性与肾移植效果的研究，大部分着眼于受者方面。本组结果显示供者基因多态性对急性排斥的发生有影响，同时不同的供受者配对方式也影响急性排斥的发生，目.独立于DR错配和冷缺血时间等因素之外。