【摘 要】
:
背景股骨头坏死是由多种原因引起股骨头血供破坏,最终导致股骨头缺血坏死及塌陷的病理过程。目前激素性股骨头缺血坏死的发病机制还不明确,随着分子与细胞生物学、干细胞等方面的研究不断深入,探讨激素作用于间充质干细胞以影响其成骨及成脂分化的研究逐年增加。激素具有诱导骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化的作用,导致脂质代谢异常,并引起成骨能力降低,过去已经在众多动物实验中得到证实,这种现象与人的激素导致的股骨头坏死
论文部分内容阅读
背景股骨头坏死是由多种原因引起股骨头血供破坏,最终导致股骨头缺血坏死及塌陷的病理过程。目前激素性股骨头缺血坏死的发病机制还不明确,随着分子与细胞生物学、干细胞等方面的研究不断深入,探讨激素作用于间充质干细胞以影响其成骨及成脂分化的研究逐年增加。激素具有诱导骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化的作用,导致脂质代谢异常,并引起成骨能力降低,过去已经在众多动物实验中得到证实,这种现象与人的激素导致的股骨头坏死病理改变相似,但由于人和动物之间存在着种属特异性,以往研究多是从动物模型中取材体外培养,而直接从人体取材的研究相对较少。本研究从人体取材体外培养,通过测定Wnt信号通路中关键因子变化来证实成脂-成骨分化机制,并寻找其与目标miRNA相关联系,对于进一步研究人股骨头坏死的病理学机制具有重要意义。目的探讨激素性股骨头坏死患者的骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化异常在股骨头坏死发生中的作用机制,通过检测其在经典Wnt/β-连环蛋白信号通路中关键因子的表达情况及miRNA高通量测序,研究人骨髓间充质干细胞成骨和成脂分化的机制。方法提取激素性股骨头坏死患者(观察组)和股骨颈骨折患者(对照组)的骨髓间充质干细胞。采用MTT法、细胞凋亡试验、活细胞和死细胞试验检测间充质干细胞增殖和凋亡的异常。成骨诱导和成脂诱导后分别进行茜素红和油红O染色,检测激素对骨髓间充质干细胞成骨及成脂分化情况。通过Western blot及实时定量PCR检测经典Wnt/β-连环蛋白信号通路中关键因子的表达情况。使用GraphPad Prism(8.0.2)进行统计分析。应用高通量测序技术对miRNA进行差异表达分析和GO、KEGG富集分析。结果结果显示激素性股骨头坏死组(0.7±0.2)相比于对照组(1.0)BMSCs增殖能力显著性降低,p<0.01。细胞凋亡检测示激素性股骨头坏死组(1.3±0.2)相比于对照组(1.0)骨髓间充质干细胞凋亡显著性升高,p<0.05。活细胞试验,激素性股骨头坏死组(414.3±26.3)相比于对照组(600.0±79.3)骨髓间充质干细胞活细胞数减少,p<0.05。死细胞试验激素性股骨头坏死组(139.3±23.0)相比于对照组(25.7±6.8)骨髓间充质干细胞死细胞数增多,p<0.01。茜素红染色显示观察组红染区域面积减少。而油红O染色显示红染脂滴数量,观察组明显增多。Western blot检测PPARγ蛋白在激素性股骨头坏死中表达升高(1.35±0.23);而RUNX2(0.58±0.11)、Wnt5a/b(0.69±0.22)、β-catenin(0.66±0.11)蛋白表达降低。实时定量 PCR 检测 BMP2(0.73+0.16)、RUNX2(0.57+0.17)、Collagen I mRNA(0.48+0.26)表达降低;而PPARG mRNA(1.48+0.32)表达升高。差异均有统计学意义。高通量测序结果显示已知差异表达的miRNA有63个,其中52个上调,11个下调。KEGG富集分析结果显示差异miRNA主要参与调节Wnt signaling pathway、Hippo signaling pathway、Calcium signaling pathway 三条激素性股骨头坏死疾病重要通路。表明miRNA在SONFH发病过程的多个环节和通路中发挥作用。结论1.激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞增殖能力下降,其经典Wnt/β-连环蛋白信号通路受到抑制,BMSCs成骨分化能力减弱,而成脂分化能力增强,继而导致成骨成脂分化平衡紊乱。2.富集分析表明 Wnt signaling pathway、Hippo signaling pathway、Calcium signaling pathway是激素性股骨头坏死疾病最重要的三条通路,尤其是Wnt信号通路对研究人的激素性股骨头坏死具有重要意义。
其他文献
背景和目的多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)常见于育龄期妇女,是一种内分泌及代谢紊乱综合征。临床表现为肥胖、月经稀少、痤疮、高雄激素血症和多囊卵巢改变等。其并发症表现形式多样,主要包括胰岛素抵抗和代谢综合征。近年来的病因学和基础研究证据发现,肥胖和慢性低度炎症在PCOS的发生发展中起着重要的作用,并且肥胖和炎症二者之间存在相互影响。氧化型低密度脂蛋白(o
背景多囊卵巢综合征(Polycystic ovarian syndrome,PCOS)是由于雄激素分泌增多,导致卵巢呈现多囊样改变的疾病,是一种生育年龄女性常见的生殖内分泌紊乱和代谢异常综合征。其严重影响全球患病女性的生理和心理健康,降低她们的生活质量。主要临床表现为月经失调和卵巢多囊样化,继而引起不孕、胰岛素抵抗等一系列症状,并会增加患者不良妊娠结局的风险。无排卵和排卵障碍是女性不孕的病因之一,
目的不孕症是一个重要的全球人类健康问题,近一半的病例与男性因素有关。氧化应激(Oxidative stress,OS)指细胞内活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的生成与清除失去平衡所致的一种细胞损伤状态,越来越多的证据表明,OS在男性不育的发生中起着独立的作用。弱精子症精液中ROS水平升高,是天然的适用于研究精子OS的研究对象。核因子E2相关因子2(nuclear f
背景及目的多囊卵巢综合症(Polycystic ovary syndrome,PCOS)是一种多基因、多因素、系统性的女性内分泌疾病,会导致不孕不育、胰岛素抵抗、肥胖和心血管疾病等,以排卵功能紊乱和高雄激素血症为特征。PCOS发病原因不明,是生殖内分泌及辅助生殖领域的研究热点难点,脂质代谢异常在PCOS发生及发展过程中扮演着重要角色。课题组前期研究表明PCOS患者卵泡液中脂肪酸代谢通路及多种脂类代
以委托代理视角透视压力型体制下基层政府间代理行为变异问题。在基层治理实践中,基层政府面对自身治理场域的特殊性及层层加码的上级派发的任务执行压力,无法完全实现统一的规定要求,在此种情境中基层政府以“共谋”形式作为应对上级问责压力的主要手段。在受到上级问责压力作用下,催化了Y县政府与县生态环境部门共谋行为的衍生发展。基层政府间的共谋行为其产生源头无非是基层政府自身避责、逐利的需求,是在当前中国行政结构
背景反复种植失败(Recurrent implantation failure,RIF)是现代辅助生殖技术(Assisted reproductive technology,ART)尚未攻克的一大难题。研究表明,胚胎实验室技术的不断进步使胚胎质量得到了优化,但子宫内膜容受性障碍仍然是影响RIF患者妊娠成功的一个突出问题,并导致大约三分之二的植入失败。因此,研究子宫内膜容受性从而能够准确识别子宫内膜
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是女性不孕的主要病因之一。PCOS是一种多因素、复杂的异质性疾病,严重影响育龄期妇女的身心健康。但目前PCOS本身的确切病因仍不清楚。许多研究表明,表观遗传变化是导致PCOS发病的潜在机制。组蛋白甲基化修饰作为一种重要的表观遗传修饰,在早期胚胎发育过程中起到了非常关键的作用。而这种表观遗传修饰变化在PCOS发病机制中的作
压力型体制及其衍生的“层层加码”现象备受学界关注,但鲜有研究对这种看似非均衡的结构为何可以持续运行多年并不断创造治理奇迹给予合理解释,而地方政府的“主动加码”现象也引人关注。文章发现,面对“任务—资源”失衡的困境,下级政府并非只有被动承压或者应付、变通等选项,其积极适应甚至“主动出击”不仅有助于将“目标加码、任务超载”转变为“任务打通、资源扩充”,缓解“任务—资源”的紧张关系,而且有助于政府间的纵
背景表皮生长因子(Epidermal growth factor,EGF)家族及受体在子宫内膜、蜕膜、胚胎及胎盘滋养层中均有表达,且随孕周增加呈动态变化,主要参与调控子宫内膜容受性、母胎对话、胚胎着床、激素分泌、滋养层细胞侵袭和妊娠维持等过程。表皮生长家族因子异常表达可能导致子痫前期、胎儿宫内生长受限等妊娠并发症的发生。已有研究阐述了 EGF对滋养层细胞侵袭能力的促进作用,但其具体机制仍有待进一步
背景:脊髓型颈椎病(CSM)是一种世界范围内常见的与年龄相关的退行性疾病,伴随着老年人口基数的增长,CSM的发病率也逐年增加。CSM可引起广泛的症状,包括颈肩部疼痛不适、四肢乏力、行走困难、肢体灵活性减退及膀胱功能障碍,是50岁及以上人群脊髓功能障碍的最常见原因。一些研究探索了有效缓解CSM患者脊髓压迫和恢复脊髓功能的方法。当保守治疗无效或症状加重时,应对CSM患者进行积极的外科干预,解除神经压迫