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背景及目的多囊卵巢综合症（Polycystic ovary syndrome,PCOS）是一种多基因、多因素、系统性的女性内分泌疾病,会导致不孕不育、胰岛素抵抗、肥胖和心血管疾病等,以排卵功能紊乱和高雄激素血症为特征。PCOS发病原因不明,是生殖内分泌及辅助生殖领域的研究热点难点,脂质代谢异常在PCOS发生及发展过程中扮演着重要角色。课题组前期研究表明PCOS患者卵泡液中脂肪酸代谢通路及多种脂类代谢物存在差异性表达,差异代谢物可能作为预测胚胎发育潜能及临床结局的潜在生物标志。卵泡内的卵泡液微环境为卵子的生长发育提供了必要营养支持。卵泡液内过量的游离脂肪酸可能对卵子和周围体细胞造成细胞损伤,导致细胞处于慢性低度炎症状态。肥胖的PCOS患者往往表现出更严重的代谢异常和不孕表型,即使在育龄期也会出现生育力降低,体外受精-胚胎移植（In vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET）的效果也不佳。中国汉族人群大样本全基因组关联研究显示Yesl相关转录调节因子（Yes1 associated transcriptional regulator,YAP1）是 PCOS 的易感基因,且在 PCOS 患者体内是高表达状态。YAP1通过Hippo通路调控细胞增殖、凋亡、分化、发育等过程。过氧化物酶体增殖激活受体γ（Peroxisome proliferator activated receptor,PPAR-γ）是脂肪细胞分化的调节因子,调节多种脂质代谢关键基因的表达,并参与卵母细胞的成熟和排卵。YAP1的同源物含有WW结构域的转录调节因子1（WW domain containing transcription regulator 1,WWTR1）通过 WW 结构域与PPAR-γ配体结合域结合,抑制PPAR-γ的活性,调节脂肪细胞分化。然而,YAP1本身能否直接与PPAR-γ结合从而调节PPAR-γ活性尚未有报道。硬脂酰-CoA去饱和酶1（Stearoyl-CoA desaturase,SCD1）在脂肪酸代谢以及不饱和脂肪酸的生物合成的过程中起着关键作用。在脂肪细胞中,PPAR-γ通过SCD1调节脂质生成。然而,SCD1在PCOS患者颗粒细胞调控脂质代谢的研究较少。本课题从PCOS患者卵泡液的脂质代谢异常机制入手,并应用转录组测序技术探究PCOS对女性转录图谱的影响,深入探讨YAP1影响PCOS脂质代谢的分子机制,明确YAP1是否以PPAR-γ为作用靶点,通过调控PPAR-γ信号通路影响脂质代谢,寻求PCOS预防及治疗的新途径。方法收集本中心PCOS患者与单纯因输卵管因素不孕患者的废弃卵泡液,提取卵泡液颗粒细胞的RNA,以单纯因输卵管因素不孕的患者群体为作为对照,通过转录组测序检测PCOS患者颗粒细胞基因水平表达变化,通过RT-qPCR检测YAP 1、PPAR-γ 及下游基因 SCD1 mRNA 水平,通过 Western blot 检测 YAP 1、PPAR-γ及SCD1蛋白表达水平。在KGN细胞系中使用小干扰RNA下调YAP1,通过RT-qPCR 检测 YAP1、PPAR-γ及下游基因 SCD1 mRNA 水平,通过 Western blot检测YAP1、PPAR-γ及SCD1蛋白表达水平,通过GPO-PAP法检测甘油三酯含量。结果1.PCOS患者转录组测序中共获得2倍以上差异表达基因（Differentially expressed genes,DEGs）521个,其中上调基因358个,下调基因163个。DEGs涉及细胞周期、细胞分裂、赤道板形成、姐妹染色单体分离等多个生物过程,参与代谢通路、细胞周期、过氧化酶体、组氨酸代谢、TGF-beta信号通路、Hippo信号通路等多条信号通路。DEGs中,脂质代谢相关基因SCD1在PCOS颗粒细胞中下调。2.YAP1在PCOS患者卵泡液颗粒细胞中mRNA表达量（1.745±0.648 vs 1.102±0.416,P=0.012）及蛋白表达量（2.464±0.837 vs 0.934±0.132,P=0.034）较单纯输卵管因素不孕患者显著升高,PCOS患者PPAR-γ的mRNA表达量（0.721±0.269 vs 1.072±0.460,P=0.041）及蛋白表达量（0.760±0.163 vs 1.050±0.100,P=0.023）显著低于单纯输卵管因素不孕患者,PCOS患者SCD1的mRNA 表达量（0.530±0.121 vs 1.079±0.343,P=0.014）及蛋白表达量（0.359±0.149 vs 0.974±0.052,P=0.002）显著低于单纯输卵管因素不孕患者。3.在KGN细胞中下调YAP1后,PPAR-γ的mRNA表达量（1.854±0.348,P=0.013）及下游基因SCD1（2.165±0.462,P=0.012）的mRNA表达量显著高于阴性对照组（NC 组）,PPAR-γ（1.902±0.827vs 1.110±0.209,P=0.113）蛋白表达量及SCD1（1.712±0.381 vs 1.234±0.259,P=0.083）蛋白表达量在两组间差异不显著,甘油三酯含量（0.0292 μmol/106vs 0.0643 μmol/1 06,P=0.01）显著低于NC组。结论1.与单纯因输卵管因素不孕患者相比,PCOS患者颗粒细胞转录组表达谱发生改变,多种脂质代谢相关基因表达异常;DEGs主要富集在代谢相关信号通路,尤其是脂质代谢相关通路。2.在PCOS患者颗粒细胞中,YAP1通过作用于PPAR-γ调控SCD1的表达,从而影响脂质代谢过程。