论文一:持久性隆起性红斑1例 论文二:华蟾素对人皮肤鳞癌A431细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及机制的研究

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目的:分析持久性隆起性红斑的临床特点及预防。方法:分析我院收治的1例持久性隆起性红斑的临床特点、诊疗经过并进行文献综述。结果:患者男,41岁,周身散在红色斑块1年余。皮肤科检查:耳廓部、颈部、躯干部、四肢伸侧散在直径2-5 cm暗褐色斑块、结节,双手可见两处钱币样大小的溃疡,无明显渗出物。组织病理示:白细胞破碎性血管炎。诊断:持久性隆起性红斑。结论:(1)持久性隆起性红斑是一种病因不明的罕见的皮肤血管炎,好发于四肢伸侧,常呈对称分布的持久性结节或斑块。(2)持久性隆起性红斑可通过组织病理学检查进行确诊。目的:探讨华蟾素(Cinobufacin)体外对人皮肤鳞癌A431细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭功能的影响及其作用机制的探究。方法:1.体外培养人皮肤鳞癌A431细胞,采用不同浓度的华蟾素作用于人皮肤鳞癌A431细胞,将A431细胞分为实验组(加药干预组)和对照组(非加药组)。2.采用不同浓度的华蟾素作用于人皮肤鳞癌A431细胞,48h后用倒置光学显微镜观察细胞形态的变化。3.采用四甲基偶氮唑蓝还原法(MTT)检测不同浓度华蟾素作用于人皮肤鳞癌A431细胞后其对细胞生长的抑制作用。4.采用transwell小室法检测不同浓度华蟾素作用于人皮肤鳞癌A431细胞48h后其对细胞迁移和侵袭能力的影响。5.采用流式细胞术Annexin V/PI双染法检测不同浓度华蟾素作用于人皮肤鳞癌A431细胞48h后其对细胞凋亡的影响。6.采用蛋白印迹法(Western blot)检测华蟾素作用于人皮肤鳞癌A431细胞后对Wnt/β-catenin信号通路中的β-catenin蛋白和凋亡抑制蛋白Bcl-2表达的影响。结果:1.华蟾素作用于人皮肤鳞癌A431细胞48h后,光学显微镜下观察细胞,实验组与对照组相比可见明显凋亡形态学变化。2.MTT法检测显示,实验组(加药干预组)和对照组(非加药组)之间进行比较,实验组细胞的增殖能力下降(P<0.05),且华蟾素对人皮肤鳞癌A431细胞增殖的抑制作用呈浓度和时间的依赖性关系。3.Transwell小室迁移实验的结果显示,实验组迁移到下室的细胞数目明显少于对照组迁移到下室的细胞数目(P<0.05),即华蟾素对人皮肤鳞癌A431细胞的迁移能力有抑制作用,且华蟾素对A431细胞的迁移抑制能力呈浓度的依赖性关系。4.Transwell小室侵袭实验的结果显示,实验组侵袭到下室的细胞数目明显少于对照组侵袭到下室的细胞数目(P<0.05),即华蟾素对人皮肤鳞癌A431细胞的侵袭能力有明显抑制作用,且华蟾素对A431细胞的侵袭抑制能力呈浓度的依赖性关系。5.通过流式细胞仪Annexin V/PI双染法检测细胞的凋亡率,两实验组分别与对照组相比,分析结果显示,实验组的凋亡率均上升(P<0.05)。6.Western blot方法检测显示,华蟾素干预后,两实验组的β-catenin蛋白的表达与对照组相比均显著下降(P<0.05),0.36ug/ml华蟾素实验组的Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05)。结论:1.华蟾素体外可抑制人皮肤鳞癌A431细胞的生长增殖,诱导其凋亡,并降低其迁移和侵袭的能力。2.华蟾素可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路中的β-catenin蛋白和下调凋亡抑制蛋白Bcl-2蛋白的表达而抑制人皮肤鳞癌A431细胞的增殖。
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