金黄色葡萄球菌是能导致人畜感染的条件致病菌,正常条件下是人和动物的常在菌,可定植于皮肤并且25-30%的健康人群鼻腔中有金黄色葡萄球菌的存在。金黄色葡萄球菌主要引起的是皮肤和软组织感染,但有时能引起严重的全身感染甚至导致死亡,特别是在其获得甲氧西林耐药性之后。在金黄色葡萄球菌获得携带mec A基因相关的遗传物质后就进化成耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）。2004年荷兰首次报道了家畜相关MRSA（LA-MRSA）感染人的案例,此后人们对LA-MRSA的关注不断提高。我国是世界养猪第一大国,同时抗生素在养殖业中使用比较普遍,因此我国猪群可能是MRSA重要的储存库,但目前关于中国猪群中金黄色葡萄球菌和MRSA的流行状况及特征研究比较缺乏。MRSA作为一种重要的有代表性的耐药性细菌,了解其在猪场中的流行情况和猪群中MRSA的特征具有重要的公共卫生学意义,同时水体作为猪场环境中的重要媒介之一对微生物的传播可能起到潜在作用。本研究基于采样分菌获得的MRSA和MSSA菌株库,研究了MRSA群体在水体存活的表型特征,分析了菌株水体存活能力与其来源、基因型的关联性,挖掘了与水体存活能力相关的基因。结果如下:1.金黄色葡萄球菌MRSA和MSSA的分离鉴定在华中地区调查了23个规模不同的猪场,用鼻拭子采集猪场中经产母猪、20周龄育肥猪、猪场工人的样品,同时用装有无菌培养基的培养瓶收集猪舍内灰尘样品,共采集了1268份样品。用两种方法分离并鉴别了MRSA:方法一先是用MRSA显色培养基筛选,用基于fem B基因的PCR检测以及生化鉴定确定MRSA;方法二是先用Baird-Parker琼脂培养基筛选,然后提取菌株DNA,用DNA扩增fem B基因,阳性者确定为金黄色葡萄球菌,然后用含有4μg/m L苯唑西林MH琼脂培养鉴别出MRSA。本实验室已经采用方法一在85份样品中分离鉴定到MRSA。猪场中所有样品的MRSA分离率为6.70%,其中母猪、育肥猪、灰尘、猪场工人样品中平均分离率分别为7.01%、5.97%、2.46%、11.54%。本研究为了从样品中同时分离MRSA和MSSA,采用方法二在193份样品中分离到金黄色葡萄球菌,其检出率为15.30%,其中93份样品中分离到的金黄色葡萄球菌是MRSA,其检出率是7.33%,另外100份样品分离到的是MSSA,其检出率7.89%。MRSA的样品占金黄色葡萄球菌样品的48.19%。用上述两种方法分离MRSA的分离率相近,方法二分离金黄色葡萄球菌没有同一份样品中同时分离到MRSA和MSSA。2.不同来源的MRSA和MSSA在水中的存活特性选择了猪场来源的MRSA 172株、MSSA 32株以及医院来源的MRSA 103株、MSSA 257株进行了水中存活能力的检测。结果显示不同来源的MRSA在水中的存活能力存在显著差异,其中医院病人来源菌株在水中的存活能力最强,然后依次是猪场工人来源菌株、育肥猪来源、猪场灰尘来源,而母猪来源的MRAS在水中的存活能力最弱。不同ST型的金黄色葡萄球菌水体存活能力有差异,其中ST9型菌株在水中的存活能力与其他ST类型菌株相比存在显著差异。相同ST型的金黄色葡萄球菌中,MSSA比MRSA在水中的存活能力强。用不同MRSA群体水中存活特性和基因组进行关联性分析发现,MRSA-ST59型菌株中一个编码假定的前噬菌体蛋白的基因（Gene2456）与MRSA的在水中的存活能力相关。实验比较表明携带Gene2456基因的MRSA-ST59型菌株比不携带该基因的菌株在水中的存活能力更强。