低弹性模量医用钛合金梯度复合材料细胞毒性研究

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目的采用MTT法观察低弹性模量医用钛合金梯度复合材料对小鼠成纤维细胞L929细胞形态及增殖率的影响、通过流式细胞仪检测低弹性模量医用钛合金梯度复合材料对L929细胞周期及凋亡的影响,探索此材料的细胞毒性,为临床应用提供实验数据。方法实验分为三个部分:1实验分五组:低弹性模量医用钛合金试件组(新钛合金组)、经氧化处理的(氧化层组)、经氧化处理并在其表面喷涂钽的低弹性模量医用钛合金试件组(钽涂层组),阴性对照组(含10%胎牛血清的RPMI1640培养基),阳性对照组(体积分数0.6%的苯酚溶液)。采用MTT法检测各组L929细胞的相对增殖率并评价细胞毒性,同时在倒置相差显微镜下观察细胞形态。所有数据使用统计学软件SPSS 17.0进行分析,设P<0.05为差异有统计学意义。2实验分五组:低弹性模量医用钛合金试件组(新钛合金组)、经氧化处理的(氧化层组)、经氧化处理并在其表面喷涂钽的低弹性模量医用钛合金试件组(钽涂层组),Ti-6Al-4V试件组(标准对照组),阴性对照组(含10%胎牛血清的RPMI1640培养基)。利用PI染色法在流式细胞仪上检测各组细胞周期变化。所有数据使用统计学软件SPSS 17.0进行分析,设P<0.05为差异有统计学意义。3实验分五组:分组同实验2,利用Annexin V/PI染色法在流式细胞仪上检测各组细胞凋亡情况。所有数据使用统计学软件SPSS 17.0进行分析,设P<0.05为差异有统计学意义。结果1对细胞增殖的影响:除阳性对照组外,其他组L929细胞形态均正常,生长良好;在相同的培养时间段,阳性对照组的光密度值低于其他组的光密度值,差异有统计学意义(P<0.05);除阳性对照组外,其他组的光密度值均随着培养时间的延长而增加,差异有统计学意义(P<0.05)。新钛合金组、氧化层组、钽涂层组三个时段的相对增殖率均大于阴性对照组的70%,并且在第三天与第五天均高于阴性对照组,而阳性对照组的相对增殖率小于阴性对照组的70%。2对细胞周期的影响:在G0/1期,新钛合金组、氧化层组与钽涂层组的细胞比例均低于阴性对照组的,差异有统计学意义(P<0.05);在S期与G2/M期,新钛合金组、氧化层组与钽涂层组的细胞比例均高于阴性对照组的,差异有统计学意义(P<0.05);钽涂层组在三个时期的细胞比例与Ti-6Al-4V组的比较无统计学差异(P>0.05)。3对细胞凋亡的影响:新钛合金组细胞早期凋亡率与阴性对照组的相比较无统计学差异(P>0.05),钽涂层和氧化层组的细胞早期凋亡率与Ti-6Al-4V组的比较无统计学差异(P>0.05)。结论1低弹性模量医用钛合金梯度复合材料在体外培养无潜在细胞毒性,并且有一定促进细胞增殖作用。2与常规钛合金Ti-6Al-4V比较,低弹性模量医用钛合金梯度复合材料对L929细胞周期与细胞凋亡无显著影响。图22幅;表10个;参102篇。
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