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目的近年来,长期低剂量铅暴露对青春期雄性生殖系统影响的问题受到关注。睾丸铁稳态与精子发生有关,甚至睾丸铁稳态失调与隐睾症和睾丸癌等疾病存在一定关系。但是有关长期低剂量铅暴露对雄性睾丸铁稳态的影响还未见报道。本研究欲通过观察长期低剂量铅暴露中睾丸内铁含量及其二价转运体（DMT1/FPN1）表达水平变化,以探讨长期低剂量铅暴露对青春期雄性睾丸中铁稳态的影响,为进一步阐明铅暴露致生殖损伤的可能机制提供理论依据。方法:1.经过一周适应期后,三周龄SPF级ICR雄性小鼠按体重随机分组,分别饮用含有0（对照组）、50 mg/L和200 mg/L醋酸铅的蒸馏水(以Pb2+计算),持续90天。2.小鼠饲养在屏障系统中,自由饮食饮水,每周固定时间测体重一次并记录。90天后,采用吸入异氟烷麻醉后解剖,心脏取全血,后解剖出睾丸、小肠、心、肝、肾、脾组织放入经过泡酸处理的塑料管中。3.（1）应用AA240FS-GTA120原子吸收光谱仪分别从升温程序和基体改进剂选取上对铅测定方法进行优化,从而提高组织样品中铅的吸光度值;（2）测定全血、睾丸和其它组织（小肠、肝、肾、脾、心）中铅、铁、锰含量;（3）铁染色（Perl’s staining）观察小鼠睾丸铁的分布;（4）使用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）检测睾丸铁转运蛋白（DMT1/FPN1）m RNA表达量;（5）使用蛋白印迹（Western blotting,WB）检测DMT1/FPN1蛋白在睾丸内表达水平。统计分析:采用SPSS17.0软件进行统计学分析,单因素方差分析,检验水准采用P＜0.05。结果:石墨炉原子吸收仪测铅优化方法:经过试验测试条件优化,铅的吸光度分别能在灰化温度为700℃,原子化温度为1500℃,灰化时间为30s时取得最大值。在1.0%NH4H2PO4,0.2%Mg（NO3）2和0.1 mg/L Pd三种基体改进剂中优选出添加5μL 1.0%NH4H2PO4对改善生物组织中铅的吸光度值效果最佳。在所选条件下,经样品回收实验测得样品回收率为89.0%～105.0%。经空白样品11次重复测量可得到的检测限（LOD）和定量限（LOQ）值分别是0.0949μg/L和0.3164μg/L。小鼠体重和睾丸质量:铅暴露组中小鼠体重和睾丸质量与对照组相比无明显差异（P＞0.05）。小鼠血液和组织中元素含量:（1）血液:小鼠全血中铅含量随着铅暴露水平升高而逐渐升高。50 mg/L、200 mg/L铅暴露组中血铅含量（6.14±0.34,11.92±2.92μg/d L）分别是对照组的（0.70±0.04μg/d L）的8.71倍和16.93倍（P＜0.05）;然而血铁水平则随着铅暴露水平呈现下降趋势。50 mg/L、200 mg/L铅暴露组中血铁水平（37.15±1.37,34.60±1.18 mg/d L）分别较对照组（41.74±1.07 mg/d L）下降11.0%和17.1%（P＜0.05）。（2）睾丸:睾丸中铅浓度随着铅暴露水平呈上升趋势,50 mg/L、200 mg/L铅暴露组中睾丸铅含量（0.13±0.04、0.20±0.05μg/g）分别是对照组（0.02±0.01μg/g）的6.67和10.17倍（P＜0.05）。睾丸铁水平亦随着铅暴露水平的升高而呈现梯度增高的趋势,50 mg/L、200 mg/L铅暴露组中铁水平（20.75±0.65、21.76±0.61μg/g）分别较对照组（17.83±1.18μg/g）上升16%和22%,P＜0.05。同时伴随睾丸内锰含量显著下降,50 mg/L、200 mg/L暴露组分别较对照组下降49.7%和63.3%,P＜0.05。（3）与对照组比较,200 mg/L铅暴露组小肠、肝、肾、脾、和心脏组织中铅含量均显著升高,P＜0.05;200 mg/L铅暴露组中,肝脏铁含量显著上升而肾铁显著下降,肾、脾、心中锰含量显著下降,P＜0.05。Perl’s铁染色法检测长期低剂量铅暴露后睾丸内铁水平:铅暴露睾丸中有明显分散颗粒状蓝色染色分布,且蓝色颗粒主要分布在精子细胞群中。200 mg/L铅暴露组中精子细胞铁沉积量明显高于对照组。睾丸组织铁转运体DMT1/FPN1 m RNA及蛋白表达水平:（1）睾丸组织中DMT1 m RNA水平随着铅暴露浓度增加而表达上调;200 mg/L铅暴露组中睾丸DMT1 m RNA表达水平明显高于对照组（P＜0.05）;FPN1 m RNA表达水平有随着铅暴露浓度增加表达上调,但各组间差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）随着铅暴露浓度升高,睾丸组织中DMT1蛋白表达水平呈现梯度升高趋势;与对照组相比,50 mg/L和200 mg/L铅暴露组DMT1蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）。FPN1蛋白表达水平随着铅暴露水平增加则呈现下调趋势,200 mg/L铅暴露组睾丸组织中FPN1蛋白表达水平显著低于对照组（P＜0.05）。结论:低剂量铅暴露能导致睾丸组织中铁富集及其转运体表达水平改变。