本文对5株来自不同产地的细脚拟青霉的产孢条件、最佳酶解条件、原生质体制备工艺和6株菌株脉冲电泳条件进行了研究，主要结果如下。　　 不同的菌株在不同的培养基、不同温度下培养2周后，产孢量和菌丝生长量都有显著差异，最佳产孢光照时间也各不相同，实验的结果为：pt165在查氏培养基上，27℃中黑暗培养产孢最好：pt173的产孢量和菌丝量的最佳条件可选取在PDA上，29℃光照2d产孢；pt208在查氏上，23℃光照培养6d产孢最好；pt223在查氏上，23℃光照培养6d产孢最好；pt45在PDA上，27℃下较长时间的光照产孢较好。　　 菌丝获取方法的不同会对菌丝酶解效果产生很大的影响，结果表明：选取液体种子转接入新鲜的培养基中，萌发一段时间后摇瓶中的菌丝生长阶段不一致，造成同样酶解时间下原生质体量的不同，使后续的实验难以进行。取长势一致的孢子悬浮液接入液体摇瓶中，孢子萌发情况一致，酶解效果很好，且实验也容易定量控制。　　 不同的菌株孢子萌发时间也对酶解效果产生很大影响，孢子浓度筛选实验结果为：pt165在孢子浓度为107个/ml浓度时，菌丝萌发的时间比孢子浓度为108个/ml以上时菌丝萌发时间短，酶解效果也比孢子浓度大的酶解效果好，其他菌株结果也一致。　　 不同的菌株由于各自细胞壁的成分有或多或少的差别，所以酶解的最佳酶解体系和最佳浓度也有差别。pt165在2％蜗牛酶+2％纤维素酶的组合下酶解4h效果最好，可以达到15.04×106个/ml以上；pt173和pt45在该组合浓度下的酶解效果也很好，酶解时间分别为3.5h、4h后产生原生质体量分别可以达到15.6×106个/ml，25.88×106个/ml； pt208在2％蜗牛酶+2％溶壁酶组合下酶解3.5h效果最好，最后结果可以达到15.12×106个/ml； pt223在该组合浓度下酶解3.5h效果也很好，可以达到9.23×106个/ml。　　 菌株在不同酶解体系下，酶解获得原生质体量的最佳时间也不一致。实验发现，纤维素酶的作用效果要缓慢一些，同样酶解条件下，如果有纤维素酶的参与，酶解的最佳时间会稍微偏长一些，但是产生的原生质体量会最终超过其他酶解体系，所以可以根据不同的实验目的选择不同的酶解体系，本实验是选择酶解时间较短的最佳酶解体系和浓度。　　 不同的酶解温度也会对酶解效果产生很大的影响。本实验选择的几个温度梯度下筛选的结果为：pt165，pt208和pt223都在37℃酶解效果最好，温度升高或降低酶解效果都降低；pt45和pt173都在29℃时酶解效果最好。　　 电泳条件筛选过程中，电泳总时间、脉冲时间、电压和角度，及缓冲液均对电泳结果产生影响。不同的菌株具有长度多态性，染色体条带的分子量有差别，电泳条件也会有很大变化，经过多次筛选所得结果为：电泳的第1阶段总时间为48h，温度为14℃，电泳液为1×TAE，0.8％的胶，电压为2v/cm，脉冲时间为20～30min，转换角度为1060；第2阶段总时间为16h，温度为14℃，电泳液为1×TAE，0.8％的胶，电压为3 v/cm，脉冲时间为500s，转换角度为106°。　　 经过对筛选条件后得到的条带分析发现：不同菌株染色体数目和长度多态性很明显，详细结果为pt173，pt223有5条或者5条以上的染色体条带，pt45有6条或者6条以上的条带，pt97和pt208至少有7条大小不同的染色体条带，以Mb为单位，其大小分别为：pt165跑出来的条带约为5.56、3.77、3.11、2.87、2.44、0.31，估计核型大小至少约为18.06Mb； pt97条带大小约为5.78、4.70、3.94、3.28、2.88、2.45、0.43，其中上往下数第2条条带异常明亮，估计是的2条或者2条以上的条带重合所致，所以其核型大小至少约为25.91Mb； pt223条带大小约为5.75、3.05、2.90、2.80、2.29，估计核型大小约为16.79Mb； Pt208条带大小约为5.37、4.49、3.50、2.99、2.72、2.46、0.44，估计核型大小约为21.97Mb； pt173电泳条带分子量大小约为5.89、3.75、3.06、2.91、2.29，核型大小至少约为17.9Mb；pt45电泳条带约为6.04、3.96、3.15、2.98、2.75、0.49，但从电泳图上可观察到从上往下第1、2、4条亮度和宽度都很大，估计有2条以上条带重合，核型大小至少为25.76Mb。