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目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种累及全身周围关节为主的,系统性、炎症性的,自身免疫性疾病。RA以慢性滑膜炎和血管翳形成为主要病理改变,滑膜炎和血管翳的持续存在可造成关节软骨和骨质破坏,最终导致关节畸形。半个世纪以来,关于RA的发病机制一直在发展变化,其中细胞因子网络失衡,各类细胞因子相互作用导致关节炎症发生,是近来受到大家认可并已得到研究证实的机制。因此,研究滑膜细胞、软骨细胞、巨噬细胞等产生的细胞因子,寻找抑制滑膜炎症和血管新生的有效靶点,一直是RA研究的热点。痹祺(BIQI.BQ)功能益气养血,祛风除湿,活血止痛,对气血不足,风湿阻滞导致的肌肉关节酸痛,关节僵硬变形等有良好疗效。但痹祺能否影响RA关节滑膜炎症和滑膜血管翳生成尚未见完整报导。本研究是在此基础上通过复制Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,模拟RA的发病过程,通过观察CIA大鼠关节炎症及滑膜的病理改变并检测骨桥蛋白(OPN)、白介素-18(IL-18)、血管生成素-1(Ang-1)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)等相关因子的表达,探讨痹祺提取物对CIA大鼠治疗的可能机制,为临床使用痹祺胶囊治疗RA提供新的实验依据。方法:1.4周龄SD雌性大鼠,采用牛II型胶原和弗氏不完全佐剂1:1混合乳剂尾根部皮下注射,建立胶原诱导关节炎大鼠模型。第一次注射0.2ml/只,间隔一周后,再次免疫,注射0.1ml/只。2.55只SD雌性大鼠,首先随机分为造模组45只和空白对照组(N)10只,筛选出造模成功42只大鼠后,按足肿胀度随机分为:模型组(C),痹祺高剂量组(BQ-15),痹祺中剂量组(BQ-10)各10只,甲氨蝶呤中剂量组(MTX-10)12只,初次免疫后两周开始给药,连续灌胃4周。3.动态观察各组大鼠精神状态、体重、活动行为等变化。4.初次免疫起,排水法隔日测量每组大鼠后肢踝关节以下体积,观察各组大鼠关节肿胀度变化。5.用药满四周后,股动脉取血处死大鼠。酶联免疫法测定血清TNF-a、IL-18、OPN、Ang-1水平,免疫组织化学染色方法检测滑膜组织中L-18、OPN、Ang-1的表达水平。同时HE染色,光镜下观察大鼠踝关节滑膜的病理改变和血管新生情况。结果:1.CIA大鼠造模成功率达93.3﹪(42/45):CIA大鼠后肢在第11天开始出现红肿,第15天达到肿胀高峰,根据大鼠的关节肿胀症状、血清TNF-a水平与正常组的比较,证实造模成功。2.关节肿胀度:BQ-10组和MTX-10在用药后前3周肿胀消退较BQ-15明显,第4周三用药组均出现明显的肿胀消退。模型组消退较用药组缓慢,用药4周末三用药组后肢肿胀度明显低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。3.足踝关节HE病理片评价:BQ-15对滑膜中性粒细胞、淋巴细胞浸润有抑制作用,MTX-10对中性粒细胞、淋巴细胞、滑膜细胞增生有抑制作用,BQ-10对中性粒细胞,淋巴细胞,浆细胞、滑膜增生均有明显抑制作用,以上结果与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。4.大鼠滑膜血管新生情况:模型组大鼠滑膜血管新生明显增多,管腔扩大充血,炎性细胞聚集。三个治疗组血管新生均较模型组减轻,MVD值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。BQ-10组MVD值较其他两治疗组降低明显,差异有统计学意义(P<0.05)5.血清细胞因子水平比较:模型组大鼠血清中细胞因子TNF-α,IL-18,OPN,Ang-1水平均较空白对照组显著升高(P<0.05)。三个治疗组各细胞因子水平则较模型组降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。其中,BQ-10可显著降低IL-18,Ang-1水平,较其他二治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05)。6.滑膜组织细胞因子蛋白表达比较:模型组大鼠滑膜组织细胞因子TNF-α,IL-18,OPN,Ang-1水平均较空白对照组有显著升高(P<0.05)。与模型组比较,三治疗组滑膜组织各细胞因子表达均有降低,且差异具有统计学意义(P<0.05)。其中,BQ-10与血清学检测相同,IL-18,Ang-1表达均显著降低,较其他二治疗组,差异均有统计学意义(P<0.05)。三个治疗组间滑膜OPN表达两两比较,差异无统计学意义(p>0.05)。结论:痹祺提取物对胶原诱导型关节炎大鼠干预效应确切,中高剂量均有降低大鼠关节肿胀症状,缓解关节炎症,抑制滑膜血管新生作用。可能是通过抑制血清TNF-α,IL-18,OPN,Ang-1多种细胞因子水平,降低滑膜TNF-α,IL-18,OPN,Ang-1等细胞因子蛋白表达而实现。实验中,我们可以发现疾病发展存在着个体间差异,不同剂量在治疗方面效果不同,正确合理的药物剂量能够增强药物的临床疗效,同时减轻毒副作用。