研究背景:子宫内膜异位症（Endometriosis,EMs）是一种常见的慢性妇科疾病,以疼痛为主要症状。桂枝茯苓汤目前广泛应用于子宫内膜异位症的临床治疗。然而,其作用机制尤其是缓解疼痛的确切机制仍不清楚。研究方法:首先,通过大鼠自体移植的方法建立大鼠子宫内膜异位症模型,研究桂枝茯苓汤对大鼠子宫内膜异位症及其疼痛的缓解作用,我们用热板检测以及激素诱导两个方法来探讨桂枝茯苓汤对于大鼠疼痛的影响;然后用免疫荧光法检测各组异位组织中神经丝蛋白200（Neurofilament-200,NF200）表达的变化;用免疫组化法和酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测大鼠异位组织及血清中白细胞介素6（Interleukin-6,IL-6）,白细胞介素 1β（Interleukin-1β,IL-1β）和肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α）的变化。为了明确其作用机制,我们用网络药理学方法分析了桂枝茯苓汤治疗后缓解子宫内膜异位症疼痛的作用通路和靶点。最后,我们通过免疫印迹法（Western blot）对各组大鼠背根神经节（Dorsal root ganglion,DRG）以及给药干预的细胞对作用通路进行了验证。研究结果:利用桂枝茯苓汤干预子宫内膜异位症大鼠模型,结果显示,桂枝茯苓汤能显著降低大鼠异位组织的体积,表明桂枝茯苓汤可以改善大鼠子宫内膜异位症症状。其次,热板实验和炎性痛实验结果发现,与对照组相比,模型大鼠的疼痛阈值显著降低,而桂枝茯苓汤处理后可以升高大鼠的疼痛阈值,减轻对疼痛的敏感性,表明桂枝茯苓汤可有效缓解子宫内膜异位症引起的疼痛,机制研究表明桂枝茯苓汤可通过降低异位组织中神经纤维的密度NF200的表达来发挥镇痛作用。接下来,通过ELISA实验发现,模型组大鼠血清中炎症因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）含量显著高于对照组,桂枝茯苓汤可以降低其含量;与该结果一致的是,桂枝茯苓汤给药处理后也引起了异位组织中炎症因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）含量的明显下降,表明桂枝茯苓汤减轻了大鼠体内的炎症水平。此外,网络药理学的分析结果显示在桂枝茯苓汤治疗子宫内膜异位症疼痛的过程中,方剂中的活性化合物可以发挥很好的抗炎作用,靶点富集的结果也表明TNF-PI3K/Akt通路在治疗疾病的过程中具有研究意义。最后,我们对各组大鼠DRG组织中TNF-PI3K/Akt通路中相关蛋白进行检测,结果显示桂枝茯苓汤可以降低其关键蛋白p-Akt,mTOR等水平;与之类似,我们发现桂枝茯苓汤还可以降低hEM15A细胞中p-Akt,p-P65和p-STAT3蛋白水平,表明桂枝茯苓汤可以抑制TNF-PI3K/Akt信号通路的激活来发挥治疗作用。结论:本课题用网络药理学与实验验证相结合的方法,系统的阐明了桂枝茯苓汤抑制子宫内膜异位症及其疼痛的机制,为中医药治疗子宫内膜异位症疼痛提供了一个可能的靶点。