复方野山杏叶袋泡茶对高血糖模型小鼠血糖影响的研究

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野山杏叶原产地为亚洲西部,在我国分布广泛,其中新疆的山杏资源更为丰富,尤其以新疆哈密地区的气候和土壤条件非常适合山杏的野外生长,是野山杏生长集中、分布较广的地区之一,形成了特有的品质。本课题以新疆哈密伊吾县境内野山杏叶为原料,研究新疆伊吾县3个不同区域的野山杏叶样本,和野山杏树枝不同位置野山杏叶样本中微量、常量元素和一些活性成分含量的测定;并以科学的配伍依据配制了以野山杏叶为主的具有降血糖作用的袋泡茶,且通过小鼠的急性毒性实验验证了其实际饮用的安全性,采用腹腔注射链脲佐菌素致实验性糖尿病小鼠模型,考察了复方野山杏叶袋泡茶对血糖的影响。本课题研究具有很大的经济效益和社会效益,对于当地野山杏产业的可持续发展具有重要意义。研究结论如下:(1)采用原子分光光度法测定不同区域野山杏叶中的微量和常量元素,并依据《中国药典》(2015版)第四部定性分析法定性分析杏叶中的化学成分种类;采用紫外分光光度法测定总黄酮、维生素C、总糖含量;滴定法测定总有机酸含量。结果:野山杏叶的8种金属元素中Ca的含量最高,测定的总黄酮、维生素C、总糖、总酸含量最高的样品分别为:样本1(杏林基地)0.210 mg/g、样本3(苇子峡乡客运站旁杏林)15.796 mg/g、样本1(杏林基地)46.820 mg/g、样本1(杏林基地)206.955 mg/g,综合分析样本1(杏林基地)的品质更优。在杏枝不同位置处野山杏叶中主要化学成分含量顺序为:总酸>总糖>黄酮,总酸、总糖、黄酮含量最高的样品依次是:样品5(杏枝中段)108.375 mg/g、样品4(杏枝顶段)1.680 mg/g、样品5(杏枝中段)0.217 mg/g。综合各种有效成分含量分析,样品5(杏枝中段)的野山杏叶品质最佳。袋泡茶提取液中含有总黄酮0.123 mg/g、总酸114.130 mg/g、总糖含 47.070 mg/g。(2)按照预先设定的浓度梯度采用单次灌胃给药进行急毒预实验,确定半数致死量(LD50);采用24h内以最大浓度最大给药体积灌胃给药2次,并持续观察小鼠各项变化,14d后对小鼠进行剖检。结果:预实验无小鼠死亡,未能测出LD50,在转做最大给药量实验中小鼠无异常变化,脏器系数与空白对照组相比无显著性差异;最大给药量为53.3 g/kg,而LD50>最大给药量。当LD50>5 g/kg时属于实际无毒性物质,表明该复方野山杏叶袋泡茶无毒,推断复方野山杏叶袋泡茶属于实际无毒性物质,临床应用较安全。(3)腹腔注射链脲佐菌素造模成功后,将其分为模型组、二甲双胍阳性对照组、复方野山杏叶袋泡茶高剂量组、中剂量组和低剂量组,分别每天灌胃生理盐水,0.75 g/kg二甲双胍水溶液、1.6 g/kg袋泡茶提取液、1 g/kg袋泡茶提取液、0.6g/kg袋泡茶提取液,连续灌胃28 d,结果表明,复方野山杏叶袋泡茶高剂量组在前9 d与高血糖模型组相比,血糖极显著降低(P<0.01),复方野山杏叶袋泡茶中剂量组和低剂量组血糖降低效果显著(P<0.05),第18 d和28 d,除袋泡茶中剂量组以外各给药组与模型组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,袋泡茶提取液的高、中剂量组灌胃的小鼠血清的PI3K(phosphoinositide-3-kinase,小鼠磷脂酰肌醇酶)明显高于模型组小鼠(P<0.01)、袋泡茶低剂量组的小鼠血清的PI3K低于模型组小鼠(P<0.05);与模型组相比,袋泡茶提取液的高、中剂量组灌胃的小鼠血清的Akt(protein kinaseB,小鼠蛋白激酶B)明显高于模型组小鼠(P<0.01)、袋泡茶低剂量组的小鼠血清的Akt低于模型组小鼠(P<0.05)。
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