【摘 要】
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目的:通过探讨活性氧对SV-40转染的人类唾液腺上皮细胞的作用的体外研究,揭示活性氧在诱导唾液腺上皮细胞凋亡中的作用机制.在基础医学和临床医学双方面为唾液腺疾病的预防、
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目的:通过探讨活性氧对SV-40转染的人类唾液腺上皮细胞的作用的体外研究,揭示活性氧在诱导唾液腺上皮细胞凋亡中的作用机制.在基础医学和临床医学双方面为唾液腺疾病的预防、发生、发展和治疗等各方面提供有力证据.材料与方法:体外培养SV-40转染的人唾液腺腺泡细胞系(NV-SV-AC),经H<,2>O<,2>处理24小时后,在荧光显微镜下观察培养细胞的形态学改变.在H<,2>O<,2>处理不同浓度(0.2-0.8mM)和时间(18-48h)过程后,通过免疫印记技术检测半胱氨酸蛋白酶(caspase)3,9和聚ADP核糖聚合酶(PARP)的表达及细胞色素C从线粒体内的释放.此外,利用AnnexinV-Cy3 hydroethidine(HE)凋亡检测试剂盒染色检测凋亡细胞磷脂酰丝氨酸(PS)的暴露,其结果利用流式细胞仪进行分析.结果:过氧化氢引发了培养细胞的典型凋亡形态学改变(染色质浓缩,核片断化);细胞色素C在细胞浆中显著增加;caspase-3,caspase-9和PARP被剪切;PS从细胞膜的内层暴露于胞膜外层.结论:过氧化氢在较低的浓度范围内(0.2-0.8mM)可有效地诱导唾液腺腺泡细胞的凋亡,而0.4mM是凋亡发生的最适浓度.其凋亡的发生机制与线粒体介导的信号传导路径密切相关.
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