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植物组织培养一般可用于植物的快速繁殖、脱毒、育种及种质资源的保存、次生代谢产物生产和基础理论研究等。目前,已经利用不同的桑树外植体建立了多种离体培养体系。每个细胞的原生质体都含有该个体的全部遗传信息,在适当的培养条件下具有再生成与其亲本相似个体的全能性,在同一时间内获得的大量原生质体在遗传上是同质的。近年来,植物原生质体的研究越来越受到重视,研究重点已从原生质体的分离、原生质体的生理生化特性和原生质体再生植株的获得,转移到原生质体的应用方面。本研究以农桑14号冬芽为外植体,以MS、B5、N6、WPM为基本培养基,附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA)、激动素(KT)和生长素(2,4-D)和萘乙酸(NAA)等,培养基中添加蔗糖3%,琼脂0.8%,pH值为5.8,研究了桑树无菌体系的建立,不同培养基组分和激素浓度对桑组培苗生长的影响,筛选出了最适的启动、分化、生根培养基。结果表明:桑树离体培养采用不同的消毒剂联合使用消毒效果最好;基础培养基采用MS培养基;添加6-BA和2,4-D时,组培苗生长高度最大为4.1 cm,最适合于桑组培苗生长;最适的启动培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L + 2,4-D 0.1 mg/L;分化培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + 2,4-D 0.1 mg/L;生根培养基为MS + NAA 0.1 mg/L。通过对农桑14号组培苗二次茎尖脱毒试验可知:对桑树茎尖脱毒培养时,39℃热处理15 d,脱毒植株平均高度达到最大值为3.8 cm;茎尖大小为0.5mm时脱毒植株平均高度最大为2.1 cm;光照有利于诱导桑组培苗茎尖萌发、生长、分化;活性炭有利于提高脱毒培养茎尖的转绿率、分化率,且茎尖发育程度高;脱毒苗生长的最优培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L;二次茎尖脱毒比一次脱毒能提高脱毒率6.67%。通过对桑树原生质体分离试验得知:黑暗处理24 h可使原生质体活力提高5%;低温处理72h可使原生质活力提高6%;原生质体分离时使用1.00 %纤维素酶(Cellulase“Onzuka”RS)+0.05 %果胶酶(Pectinase Y-23)+0.20 %离析酶(Macerozyme R-10)的酶解酶液组合酶解效果最好,原生质体产量达8.3×106个/mL;26℃黑暗条件,酶解12-14 h分离得到的原生质体产量提高5倍,活力提高4倍。