【摘 要】
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包括口腔癌在内的头颈部肿瘤已经成为世界上第六大高发肿瘤，口腔癌中主要高发的是鳞状细胞癌。淋巴结和远处的转移成为口腔癌低存活率的主要原因。传统的治疗手段可能损害患者
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包括口腔癌在内的头颈部肿瘤已经成为世界上第六大高发肿瘤，口腔癌中主要高发的是鳞状细胞癌。淋巴结和远处的转移成为口腔癌低存活率的主要原因。传统的治疗手段可能损害患者的外观，并且没有明显地提高患者的存活率。因此，寻求新的具有科学性的治疗手段是十分必需的。近年来，利用溶瘤性病毒进行肿瘤治疗的研究得到了越来越多的关注，新城疫病毒(NDV)就成为其中之一。 目的:探讨新城疫病毒D90在抗人类口腔鳞状细胞癌细胞系HN-6方面的作用以及所涉及的机制。 方法:运用MTT实验法检测NDV D90毒株对HN-6细胞的存活率所起到的抑制作用;运用倒置显微镜以及DAPI荧光染色对NDV D90毒株对HN-6作用前后细胞形态学的变化进行观察;利用AnnexinⅤ-FITC/PI双染色流式细胞术检测新城疫病毒D90毒株是不是可以引发口腔鳞癌细胞系HN-6细胞的凋亡;免疫印迹检测D90作用HN-6细胞后，使其凋亡关系蛋白和影响迁移和侵袭能力的相关蛋白的表达情况;Transwell法检测新城疫病毒D90关于HN-6细胞迁移和侵袭率所起到的抑制作用;利用免疫细胞化学的方法检测新城疫病毒D90毒株对HN-6细胞的微管和微丝形态改变的影响作用。 结果:MTT法结果显示NDV D90能够明显地抑制HN-6细胞的存活率;DAPI荧光染色的结果显示D90作用HN-6细胞之后细胞核出现了凋亡的相关形态改变，如核固缩以及核碎裂;流式细胞术结果证明D90引起的细胞死亡主要是凋亡;western blotting检测结果显示随着病毒干预时间的加长，Cytochrome C蛋白表达水平升高，procaspase-3以及procaspase-9蛋白表达水平反而随之降低，但是发现procaspase-8蛋白表达水平没有明显变化，同时没有检测到TNF-α蛋白的表达;免疫细胞化学结果显示，D90通过改变细胞的微管和微丝形态来抑制细胞的能动性同时具有抑制HN-(6)细胞的迁移和侵袭的功能;NDV D90通过下调SP1和上调RECK的蛋白表达来抑制金属基质蛋白酶MMP-2和MMP-9的蛋白表达。 结论:(1) NDV D90毒株明显抑制人口腔鳞癌细胞系HN-6的存活率，且抑制效果是呈剂量-时间依赖性;(2) NDV D90毒株主要通过引发HN-6细胞凋亡而导致其死亡，且引发HN-6细胞凋亡的机制可能主要是通过线粒体途径，死亡受体途径没有被激活或者所起的作用非常小;(3) NDV D90毒株能够显著地抑制HN-6细胞的迁移和侵袭能力，并且主要是通过下调SP1蛋白的表达和上调RECK的蛋白表达来达到抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达的作用，从而进一步实现新城疫病毒D90毒株对于HN-6细胞迁移和侵袭能力的抑制作用。
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