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哺乳动物血糖调控主要是依靠胰岛素刺激脂肪和肌肉细胞内部的葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)转运到细胞膜上,再将血液中的葡萄糖转运到细胞中来降低血糖。这一调控过程出现问题就会导致糖尿病(Diabetes)。
哺乳动物中有近70种Rab蛋白,它们通过在与GTP结合的活化形式和与GDP结合的失活形式之间的转换来特异的调控囊泡转运的各个步骤,包括囊泡的形成,运输,锚定和融合的过程。
Rab蛋白作为连接胰岛素信号转导通路和GLUT4囊泡转运通路的关键蛋白,是本领域研究的重点。目前我们还不清楚,哪些Rab蛋白参与了胰岛素调控的GLUT4转运过程。研究这一问题的困难在于GLUT4广泛存在并且动态循环于内质网,高尔基体,内涵体和特异性响应胰岛素信号的葡萄糖转运蛋白4储存囊泡(GLUT4 Storage Vesicle,GSV)中。没有一种特异的方法能将GSV和其他含有GLUT4的细胞组分区别开。
我们以3T3-L1脂肪细胞为对象,创造性的利用pH值敏感的荧光蛋白IRAP-pHluorin和双通道全内反射荧光显微术实时观测活细胞中荧光标记的GLUT4囊泡和Rab蛋白的运动,筛选了25种Rab蛋白。最终发现Rab10特异的参与了胰岛素调控的GSV转运上膜的过程。此外,我们还发现Myosin-Va通过与Rab10的相互作用,也参与调控这一过程。