无核葡萄胚挽救影响因素研究与分子标记辅助选择

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无核是鲜食葡萄的重要性状,无核葡萄是葡萄育种的目标之一。传统的无核葡萄育种是通过有核葡萄×无核葡萄杂交,后代中无核率极低,育种效率低,而胚挽救可以无核葡萄作母本杂交,提高了后代无核率,并缩短育种周期,因而被广泛用于无核葡萄育种中。目前仍存在胚挽救成功率较低的问题,因而有必要进一步研究和优化胚挽救技术体系。本研究以5个种子败育型无核葡萄品种作母本,2个抗寒品种或杂种作父本杂交,共配置8个杂交组合,以MM3固-液双相或MM3固体培养基作为胚珠培养基,之后剥取裸胚在WPM固体培养基上萌发成苗,探究培养基形态、亲本基因型及胚珠培养时间对胚挽救效果的影响,旨在优化胚挽救技术体系,同时创制无核葡萄新种质,并结合无核性状分子标记SCF27-2000辅助选择,为进一步选育无核葡萄新品种奠定基础。主要结果如下:1.8个组合接种胚珠共计8 204个,获得1 722个发育胚,萌发1 415个,最终获得894株正常苗,平均胚发育率、萌发率和成苗率分别为20.98%、17.25%和10.90%。2.培养基形态对不同杂交组合胚挽救效果的影响不尽相同,‘秦秀’ב北醇’、‘克瑞森无核’ב北醇’和‘秦红1号’ב金星无核’的胚发育率在MM3固-液双相培养基中显著高于MM3固体培养基,而‘木星’ב北醇’和‘秦红1号’ב北醇’的胚发育率在MM3固体培养基中显著高于MM3固-液双相培养基。3.亲本基因型对胚挽救效率影响显著。以‘北醇’作父本时,‘波尔莱特’作母本的胚发育率、萌发率和成苗率(46.31%、41.74%和17.95%)最高,其次为‘秦红1号’(29.24%、23.71%和 15.95%),而‘克瑞森无核’(2.52%、1.96%和 0.84%)最低。以‘金星无核’作父本时,仍以‘波尔莱特’作母本的胚发育率、胚萌发率和成苗率(37.08%、25.41%和24.17%)最高,说明‘波尔莱特’和‘秦红1号’较适宜作胚挽救母本。4.胚珠暗培养7-10周时,随培养时间的延长,‘波尔莱特’ב金星无核’和‘秦红1号’ב金星无核’的胚发育率、胚萌发率及成苗率均在MM3固-液双相培养基中培养10周时达到最大值,分别为46.67%、36.67%和36.17%以及16.43%、10%和 7.68%。5.利用无核分子标记SCF27-2000对胚挽救获得的894株杂种苗进行辅助选择,其中559个株系拥有该标记,初步鉴定为无核株系。
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