冠突散囊菌固态发酵对槟榔籽多酚组分及抗氧化活性的影响

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槟榔是一种分布于世界热带地区的药用植物,比如,在我国海南省,槟榔有着很可观的产量。随着历史变迁,槟榔从“南药”慢慢渗透入食品,嚼食槟榔渐渐成为了槟榔的一种食用方式。而食用槟榔的产品均保留槟榔壳,在生产过程中往往会产生大量的槟榔果仁即槟榔籽的废弃物,减少废弃槟榔籽的浪费便成了槟榔行业亟待解决的问题。在国内外对槟榔籽生物活性成分进行评价的试验中,发现其含有较多的多酚类物质。冠突散囊菌作为茯砖茶中的优势益生菌,近年来也被应用于发酵各种植物原料,发现其不仅可以提高黑茶的抗氧化性,对其他植物原料也有着相似的作用。因此,本文拟以冠突散囊菌固态发酵槟榔籽,以多酚含量为评价指标,优化槟榔籽发酵条件,通过高效液相色谱法对比发酵前后的多酚组分,并进行体外抗氧化活性分析,同时以秀丽隐杆线虫作为模式生物,探究槟榔籽发酵产物干预对其体内抗氧化酶活的影响。得到如下研究结果:1.以多酚含量为指标对冠突散囊菌固态发酵槟榔籽的条件进行响应面优化,并且得到最优的发酵条件:接种量0.78%、发酵温度30.56℃、料液比1:1.08(g/m L)、糖添加量16.69%,在此条件下,回归模型预测的多酚含量理论值可达19.28μg/m L没食子酸当量,即1.928 mg/g。根据现实情况略微修正为接种量0.8%,发酵温度30.5℃,料液比1:1.08,糖添加量16%,在此条件下可得到的多酚含量为19.19±0.083μg/m L没食子酸当量,即1.919±0.083 mg/g,与预测值接近。2.通过高效液相色谱法对比发酵前后槟榔籽多酚组分,在未发酵的槟榔籽多酚中检测出了没食子酸(GA)、绿原酸、儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、芦丁、表儿茶素没食子酸酯(ECG);发酵后的槟榔籽多酚中检测出了没食子酸(GA)、儿茶素(C)、表儿茶素(EC)、芦丁、表儿茶素没食子酸酯(ECG)、茶黄素。由此可以得出,发酵后槟榔籽多酚中未检测出发酵前出现的绿原酸,而在发酵后的多酚物质中,出现了发酵前未检出的茶黄素。发酵后的儿茶素和表儿茶素没食子酸酯含量增加,而没食子酸、表儿茶素和芦丁物质呈下降趋势。冠突散囊菌对槟榔籽多酚组分发酵作用的具体机制途径有待进一步研究。3.在发酵前后槟榔籽多酚提取物的体外抗氧化性试验中,经冠突散囊菌发酵后的样品具有比未发酵样品更好的抗氧化活性,其DPPH自由基、羟基自由基和ABTS·+自由基的清除率最高可达84.48%、66.39%、76.97%,总抗氧化能力也达到了1.50m M与Vc接近的硫酸铁当量。4、发酵前后的槟榔籽多酚提取物存在一定的急性毒,这可能受到了提取溶剂和提取物的纯度的影响;根据急性毒理试验确定样品浓度为200μg/m L、500μg/m L、1000μg/m L,并且发现随着发酵前后的多酚提取物浓度的不断上升,秀丽隐杆线虫体内的CAT、GSH-PX、SOD活力上升,MDA含量下降,说明多酚含量越高,体内抗氧化效果越好;同时发酵后的各项指标均优于发酵前,说明冠突散囊菌的发酵能促进槟榔籽抗氧化性能。综上所述,冠突散囊菌发酵槟榔籽提高了其多酚含量和抗氧化活性,但对其多酚组分变化的具体影响途径和降低槟榔籽毒性方面仍需要更多的探索。
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