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‘西伯利亚’百合(Lilium‘Siberia’),有着洁白的花瓣和浓郁迷人的芳香,其花型态优美且花色丰富,在国际切花市场很受欢迎。‘西伯利亚’百合作为本实验研究材料,通过RT-PCR、GFP亚细胞定位、瞬时过表达、BSMV病毒沉默、荧光定量PCR、酵母双杂交(Yeast-two hybrid)和GC-MS等方法,研究了百合LoMYC2转录因子在花香物质形成中的作用以及与Lo MYBs的互作关系。主要研究结果如下:1.采用RT-PCR技术,从百合花瓣中克隆了的LoMYC2基因,该基因c DNA长度为2115bp,编码704个氨基酸(aa),LoMYC2是亲水蛋白,分子量为76.6k Da,等电点(p I)为5.29。LoMYC2在N端有一个b HLH结构域和在C端有三个HLH结构域,属于MYC转录因子家族。进化树和氨基酸比对结果显示,LoMYC2与单子叶植物菠萝(Ananas comosus)和铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)的MYC2同源性最高。2.采用RT-qPCR分析了LoMYC2的时空表达规律。结果表明LoMYC2在萼片、花瓣、雄蕊、雌蕊、叶片、地上茎、鳞茎和根中均有表达,但雌蕊中表达量最高,其次是花瓣和地上茎,而根中表达量最低。LoMYC2的表达与开花进程不完全一致,花蕾到初开期LoMYC2表达量增高,半开期降到最低值,在盛开期到衰败期时表达量再次升高到达最大值。3.对LoMYC2的亚细胞定位进行预测,在501-511有核定位信号PRPRKRGRKP,推测其定位在细胞核。进一步构建了LoMYC2的GFP融合表达载体,通过根癌农杆菌介导瞬时转化洋葱表皮细胞,并用细胞核染料DAPI染色,以空载p35S-GFP为阴性对照,只有细胞核呈现绿色荧光信号,证明LoMYC2定位于细胞核。4.构建LoMYC2的植物病毒沉默载体,通过携带LoMYC2重组载体的根癌农杆菌侵染‘西伯利亚’百合花瓣和萼片进行瞬时干涉。结果表明,LoMYC2表达量下降47.33%,Lo MYB1下降46.04%,Lo MYB2下降43.85%,Lo MYB3下降71.08%,Lo AAT下降35.15%,Lo TPS下降19.38%;用GC-MS对花瓣进行测气分析,罗勒烯含量下降57%,沉香醇下降79.36%,苯甲酸甲酯下降73.15%。5.构建LoMYC2的植物过表达载体,通过携带LoMYC2的过表达载体的根癌农杆菌侵染‘西伯利亚’百合进行瞬时表达。结果表明过表达LoMYC2后,与对照相比,LoMYC2表达量升高89.27%,Lo MYB1升高119.76%,Lo MYB2升高1.2%,Lo MYB3降低37.16%,Lo TPS升高62.82%,Lo AAT升高4倍。罗勒烯含量增加1.8倍,沉香醇增加1.78倍,苯甲酸甲酯增加1.1倍,别罗勒烯增加3.09倍。6.构建LoMYC2全长酵母双杂交诱饵载体和Lo MYBs全长酵母双杂交捕获载体,酵母双杂交结果表明LoMYC2能够与Lo MYB1、Lo MYB3互作。