人RPE细胞培养和可见光对培养细胞损伤及其防护的实验研究

来源 :华西医科大学 四川大学华西医学中心 四川大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bbben
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该研究利用组织培养技术,培养了健康成年人视网膜色素上皮(Retinal Pigment Epithelium, RPE)细胞.光镜观察,刚分离下的RPE细胞呈圆形,含有丰富的黑色素颗粒,看不到细胞核;4~5天时细胞开始贴壁变扁平,伸出伪足,呈集落样生长,同时显示清晰透明的圆形细胞核,并可见双核细胞;约于接种后28天细胞达铺满状态.此时细胞呈致密排列的六边形,细胞内黑色素颗粒较培养初期减少.第一次继代培养的人RPE细胞的对数生长期位于接种后2~5天,群体细胞倍增时间约为2.27天.扫描及透射电镜观察,原代培养的人RPE细胞单层生长,呈表面略隆起的半球状,直径约10~35μm;细胞顶端有微绒毛,基底膜存在内褶,细胞间具有连接复合体,细胞内含有丰富的线粒体、内质网等细胞器以及特征性的黑色素颗粒.培养细胞未见其它形态.证实所培养的细胞为单纯RPE细胞.在此基础上,制作了可见光对培养的人RPE细胞光化学损伤模型,以探讨损伤发生的机理.作者还进一步观察到可见光降低了培养的人RPE细胞的生长能力,而外源性SOD和CAT则对培养细胞具有一定的保护作用.从这一个方面提示,在RPE细胞光化学损伤过程中自由基可能起着重要作用.
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