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目的:观察X线对SD雌性大鼠卵巢的辐射损伤效应以及S1P预处理对卵巢的保护作用。方法:6-8周龄雌性SD大鼠18只,体重198.4±10.6g,随机分为对照组、辐射组和S1P+辐射组（每组6只）。辐射组和S1P+辐射组大鼠下腹部生殖系统区域进行总剂量2Gy的6-MVX线照射。S1P+辐射组大鼠从辐射前72小时开始腹腔注射S1P溶液（0.5mg/kg）,每天一次,直到被处死;对照组和辐射组大鼠同时予腹腔注射等体积溶解S1P的溶剂（含终浓度4mg/ml BSA的PBS溶液）直至处死。辐射后24小时及72小时,每组随机处死3只大鼠。处死前取大鼠左心室血清,ELISA法检测AMH水平。大鼠处死后取左侧卵巢行组织病理切片,采用HE染色方法染色后观察卵巢形态改变并进行卵泡计数。结果:1、辐射组大鼠血清AMH浓度低于对照组,S1P处理后这种下降趋势得到抑制,这种差异在辐射后24小时组无统计学意义（p＞0.05）,而在辐射后72小时组差异有统计学意义（p＜0.05）。2、卵巢组织切片病理检查结果显示,辐射后24小时大鼠卵巢组织结构和卵泡计数各组间无明显差异;辐射后72小时,辐射组大鼠卵巢结构紊乱,卵巢损伤形态明显,表现为皮质出血,卵巢间质增生,卵泡明显减少;而S1P预处理组大鼠卵巢结构无明显异常,卵泡计数显著多于辐射组。结论:辐射导致雌性SD大鼠血清AMH水平下降,卵巢结构破坏,卵泡数量减少。S1P可显著缓解辐射所致卵巢损害。目的:探讨线粒体相关基因与S1P防护辐射损伤作用的关系,并初步筛选出意义明显的相关基因。方法:用第一部分中保存备用的X线照射、S1P+X线照射及对照组大鼠右侧卵巢组织提取RNA,进行mRNA高通量测序并筛选差异表达mRNA。对差异表达mRNA进行GO功能分析和KEGG通路分析,采用生物信息学方法进一步筛选出差异表达明显且与线粒体相关基因。对筛选出的差异表达基因应用RT-qPCR方法验证。结果:1、在辐射后24小时,与对照组相比辐射组中274个mRNA表达下调,143个mRNA表达上调;与辐射组相比,S1P+辐射组有155个mRNA表达上调,100个mRNA表达下调。辐射后72小时,与对照组相比辐射组有119个mRNA表达下调,116个mRNA表达上调;与辐射组相比,S1P+辐射组有133个mRNA表达上调,180个mRNA表达下调。2、对差异表达的mRNA进行GO分析和KEGG通路分析,筛选出与线粒体功能相关的基因,24小时组为:Uqcrh基因、Micu2基因和Gpx4基因;72小时组为Acat1基因、Alas2基因、Arsb基因、Gsr基因、Ppif基因和Uqcrb基因。这些线粒体功能相关基因的表达在辐射后明显下调,而S1P可以减弱这种变化。3、KEGG通路分析结果显示S1P对辐射导致的线粒体功能相关基因损害的保护作用在辐射后24小时更显著。4、RT-qPCR方法对辐射后24小时各组大鼠卵巢组织Uqcrh基因、Micu2基因和Gpx4基因的mRNA表达进行检测,结果与高通量测序结果一致:辐射组大鼠卵巢Uqcrh、Micu2、Gpx4三组基因mRNA的表达均少于对照组,而S1P处理组其下降趋势均明显得到抑制,差异均有统计学意义（p＜0.05）。结论:辐射致卵巢损伤以及S1P对卵巢辐射损伤的保护作用均有线粒体相关基因参与其中,S1P对线粒体的保护作用在辐射后24小时更为显著。目的:探索辐射是否导致卵巢颗粒细胞系——KGN细胞株发生铁死亡,并探索S1P对辐射诱导的铁死亡是否具有抑制作用以及可能的作用机制。方法:1、将KGN细胞分组处理:直接暴露X线辐射、铁死亡抑制剂DFO预处理以及S1P预处理后暴露X线辐射,流式细胞术检测各组细胞死亡率,透射电镜观察细胞内线粒体结构变化,检测各组细胞Fe2+以及谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的含量,以及抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性,采用RT-qPCR方法检测GPX4mRNA表达情况,Western bolt方法检测各组细胞膜铁转运蛋白FPN1、转铁蛋白受体TfR1的表达;2、siRNA转染沉默S1P预处理+X线辐射组细胞的GPX4,检测细胞内Fe2+以及谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的含量以及抗氧化酶超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性,应用Western bolt方法检测FPN1、TfR1的表达。结果:1、X线辐射后细胞死亡率增加,铁死亡抑制剂DFO和S1P均对X线辐射诱导的KGN细胞死亡具有防护作用;2、透射电镜观察显示:辐射后的KGN细胞内线粒体显示出铁死亡的特征性形态学变化:体积变小,膜密度增高,嵴减少,S1P预处理组细胞内线粒体形态相对正常;3、与对照组相比,X线辐射后KGN细胞GPX4 mRNA表达显著下降,细胞内谷胱甘肽（GSH）含量显著下降,SOD、CAT以及GSH-PX酶活性均显著降低,MDA含量明显增加,细胞内Fe2+明显增加,FPN1蛋白表达下调,TfR1蛋白表达上调,差异均有统计学意义（p＜0.05）;4、与辐射组相比,DFO、S1P预处理组GPX4 mRNA表达增加,GSH含量增多,SOD、CAT以及GSH-PX酶活性增强,MDA含量减少,细胞内Fe2+减少,FPN1蛋白表达上调,TfR1的表达下调,差异均有统计学意义（p＜0.05）;5、用siGPX4干扰GPX4表达后,S1P预处理组KGN细胞辐射后死亡率升高,线粒体体积变小,膜密度增高,嵴减少;细胞内GSH含量明显减少,SOD、CAT以及GSH-PX酶活性下降,MDA含量增加,细胞内Fe2+显著增多,FPN1蛋白表达下调,TfR1的表达上调,差异显著,均有统计学意义（p＜0.05）。结论:辐射可以导致KGN细胞发生铁死亡,S1P通过上调GPX4对辐射诱导的铁死亡起到抑制作用。