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目的:探讨益气健脾、补益气血中药促进难愈性创面愈合的可能机制。
方法:通过外科方法建立大鼠全层皮肤缺损模型,在此基础上肌肉注射氢化考的松,建立难愈性创面大鼠模型,观察益气健脾、补益气血中药对难愈性创面愈合的影响,并运用流式细胞仪技术检测各组创面新生肉芽组织细胞周期、细胞凋亡指数情况,运用免疫组化、图像分析的技术手段检测各组创面新生肉芽组织中PCNA、VEGF的表达水平。
结果:1.创面愈合情况(创面愈合率、创面愈合时间):模型对照组明显劣于一般创面组(P<0.01);各中药治疗组均优于模型对照组(P<0.01或P<0.05);四君子汤组与一般创面组无明显差别(P>0.05),四物汤组、八珍汤组劣于一般创面组、四君子汤组(P<0.01或P<0.05),四物汤组、八珍汤组无明显差别(P>0.05)。
2.创面肉芽组织细胞增殖水平(肉芽组织干湿比重、成纤维细胞数量、细胞周期、增殖细胞核抗原):模型对照组明显低于一般创面组(P<0.01);各中药治疗组高于模型对照组(P<0.01或P<0.05);四君子汤组细胞部分低于一般创面组(P<0.01或P<0.05),部分与一般创面组无明显差异(P>0.05),四物汤组、八珍汤组低于一般创面组、四君子汤组(P<0.01或P<0.05),四物汤组、八珍汤组除细胞周期外无明显差异(P>0.05)。
3.创面肉芽组织细胞凋亡指数:模型对照组明显大于一般创面组(P<0.01);各中药治疗组明显小于模型对照组(P<0.01);各中药治疗组均明显大于一般创面组(P<0.01),四君子汤组、四物汤组、八珍汤组组间两两比较无明显差别(P>0.05)。
4.创面血管新生水平(微血管计数、血管内皮生长因子):模型对照组明显低于一般创面组(P<0.01);各中药治疗组高于模型对照组(P<0.01或P<0.05);各中药治疗组明显低于一般创面组(P<0.01),四物汤组、八珍汤组低于四君子汤组(P<0.01或P<0.05),四物汤组、八珍汤组无明显差别(P>0.05)。
5.血液流变学:四君子汤组全血高切粘度明显小于八珍汤组(P<0.01),与四物汤组无明显差别(P>0.05),四物汤组、八珍汤组比较无明显差别(P>0.05)。四君子汤组低切还原粘度小于八珍汤组(P<0.05),与四物汤组比较无明显差别(P>0.05),四物汤组、八珍汤组比较无明显差别(P>0.05)。四君子汤组聚集指数小于四物汤组、八珍汤组(P<0.05),四物汤组、八珍汤组比较无明显差别(P>0.05)。
结论:1.模型对照组创面愈合率明显低下,愈合时间显著延长,其难以愈合的机制之一可能与肉芽组织成纤维细胞增殖不足、凋亡过度,血管内皮细生长因子表达水平低下有关。
2.益气健脾、补益气血中药能明显提高难愈性创面创面愈合率,缩短创面愈合时间,促进创面愈合,其机制可能在于:
2.1益气健脾、补益气血中药能促进肉芽组织成纤维细胞增殖。
2.2益气健脾、补益气血中药能抑制肉芽组织成纤维细胞凋亡。
2.3益气健脾、补益气血中药能提高血管内皮生长因子表达量。
3.四君子汤组促进难愈性创面愈合的作用优于四物汤组、八珍汤组,可能与四君子汤促进肉芽组织成纤维细胞增殖的能力更强,诱导新生血管的作用更为明显,并能在一定程度上改善创面的高粘、高聚状态,改善局部的微循环有关。