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霍山石斛(Dendrobium huoshanense)是我国一种稀有的药用植物,其根茎(俗称米斛)常被用做一种滋补、保健饮品。多糖是霍山石斛中一种活性显著的化学组分,具有抗氧化和调节免疫等多种生物活性。本研究采用热水浸提、阴离子交换和葡聚糖凝胶层析从霍山石斛中分离、纯化出若干种不同的多糖组分,结合化学和波谱学方法分析了不同多糖组分的结构特征;利用四氯化碳(Carbon tetrachloride, CCl4)构建的小鼠急性肝损伤模型对不同多糖组分的保肝活性进行了评价,以期阐明霍山石斛保肝多糖的性质特征,建立其功能与结构之间的联系。主要研究结果如下:1.利用DEAE-纤维素阴离子交换树脂从霍山石斛粗多糖(DHP)中分离出4中不同的多糖组分。DHP1为中性多糖,主要由葡萄糖、半乳糖和微量的甘露糖组成,相对分子质量为10KDa;其余三种多糖组分为酸性多糖,其中DHP2和DHP3中含有较多的半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖,而DHP4中则主要由半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖和葡萄糖组成;三种多糖的相对分子质量均在5000KDa以上。与三种酸性多糖相比,DHP1清除DPPH自由基和羟基自由基的能力更强,同时可以更有效地抑制脂质过氧化反应,是DHP中有效的抗氧化多糖组分;2.利用CCl4构建了小鼠的急性肝损伤模型,评价了霍山石斛中不同多糖组分的保肝活性。结果表明,DHP1的预处理可以有效增强小鼠肝组织对CCl4毒性的抵抗力,降低了CC14诱导的血清中谷丙酸转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性的升高,抑制了肝组织中丙二醛(MDA)的过量表达,同时恢复了超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性,呈现出良好的预防肝损伤作用;3.采用Sephadex G-100凝胶层析对DHP1进一步分离和纯化,得到DHP1A和DHP1B两种多糖片段。DHP1A的相对分子质量为6.7KDa,主要由葡萄糖和甘露糖组成:甲基化和核磁共振研究发现,DHP1A的主链主要由1→4连接的葡萄糖和1→4连接的甘露糖构成。DHP1B的相对分子质量为3.51KDa,主要由葡萄糖组成,其主链则主要由1→4和1→4,6连接的葡萄糖构成。体外抗氧化实验表明,DHP1A清除DPPH自由基和羟基自由基的能力,以及抑制脂质过氧化的能力均高于DHP1B;4.进一步评价了DHP1A的保肝功效,结果表明,DHP1A的摄入可以有效降低CC14肝损伤中各种生化指标的升高,降低了丙二醛和8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的产生;DHP1A可以调节小鼠肝内各种炎性分子的表达,如肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、巨噬细胞炎性蛋白(MIP)-2和CD68。此外,DHP1A还干扰了CCl4诱导的核因子(NF)-κB的激活,缓解了小鼠的肝损伤。