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苹果酒是仅次于苹果浓缩汁的第二大苹果加工产品,其市场消费潜力巨大,但长期以来,没有高品质的苹果酒专用酵母及与之相配套的发酵工艺,使得我国苹果酒产业起步晚、发展慢,本研究在选育出的优良苹果酒酵母基础上,提出了苹果酒连续化发酵的技术方法,并针对苹果酒连续化发酵的核心技术—苹果酒酵母固定化进行了系统试验优化,建立了基于CAC载体的苹果酒固定化技术方法。通过试验得出以下结论:(1)优良固定化苹果酒酵母的筛选:采用本实验室保藏的10株酿酒酵母(P6、P8、P11、P14、P15、W25、W38、W41、W52和W65)为备选菌株,以专用啤酒酵母7#和葡萄酒酿酒酵母3#为对照,通过系统试验,包括试验酵母菌落形态和感官评价、发酵能力比较和发酵所得苹果酒品质的评价,筛选出五株优良苹果酒酿酒酵母P14、W25、W38、W41、W65,它们发酵的原酒酒精度均达100.0 mL/L以上,酒体澄清透明,具有苹果酒的典型风味。再采用海藻酸钙载体固定化筛选出来的五株酵母,进行发酵试验,结果表明海藻酸钙载体对五株酵母的发酵性能优劣顺序影响不大,游离酵母W41在固定化前后发酵性能均为最优的,因此选择W41为生产苹果酒的最佳固定化酵母。(2)优良固定化载体的筛选:分别以海藻酸钙(Calcium Alginate GLA)、海藻酸钙-聚乙烯醇(GLA-PVA)和海藻酸钙-壳聚糖(ACA)固定化最佳苹果酒酵母W41和7#啤酒酵母,通过比较固定化载体的物理性能和发酵性能,发现ACA是一种适用于苹果酒酵母W41连续发酵的良好固定化载体,具有工业化应用的前景。(3)载体ACA的固定化条件的优化:以苹果酒酵母固定化载体ACA的机械强度和通透性为指标,通过单因素试验观察了海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、壳聚糖溶液浓度、针头型号、固化时间和液化时间对制备固定化载体ACA的影响;并通过正交实验L27(313)优化了载体ACA的制备工艺。试验结果表明,四个因素中海藻酸钠浓度(A)对载体ACA的机械强度和通透性具有极显著性影响,氯化钙浓度(B)对载体ACA的机械强度影响显著,壳聚糖浓度(C)对载体ACA的通透性影响显著,而交互作用(A×B)、液化时间(D)对载体ACA的机械强度和通透性影响均不显著;制备苹果酒酵母固定化载体ACA的最佳条件为海藻酸钠溶液浓度为2.0%,CaCl2溶液浓度为2.0%,壳聚糖溶液浓度为0.2%,液化时间为10min。