论文部分内容阅读
目的:观察MAL/MAPK/ERK通路在哮喘大鼠气道中的表达以及对气道炎症因子的影响,探讨柴朴汤治疗哮喘的机制。方法:40只雄性健康的SD大鼠,体重(220±20)g,按随机表随机分为4组,每组各10只,即(A组)哮喘组、(B组)柴朴汤组、(C组)柴朴汤+MAPK/ERK通路抑制剂PD98059简称抑制剂组、(D组)正常对照组。A、B、C组以卵蛋白致敏激发哮喘模型,同时B组在激发前半小时予以柴朴汤2ml(给药浓度1.5g/kg)灌胃。C组在激发前腹腔注射给予PD98059(3mg/Kg),同样给予柴朴汤2ml灌胃。D组以等量生理盐水代替雾化及灌胃。最后一次激发24h后处死大鼠。取肺组织行HE染色、图像分析。用半定量RT-PCR检测肺组织中MAL、Eotaxin、IL-4、IL-10的mRNA表达;免疫组化检测p-ERK1/2、MAL、Eotaxin、IL-4、IL-10的蛋白在肺组织中的表达。结果:大鼠肺组织常规病理切片于显微镜下观察,D组大鼠支气管肺组织结构完整,管腔光滑,周围偶见(嗜酸性粒细胞)炎性细胞浸润,上皮细胞无明显增生。A组管腔狭窄明显,气道平滑肌增厚,上皮细胞大量增生、脱落,粘液分泌增多,可见大量的嗜酸性粒细胞浸润。B、C组上述改变较A组轻。MAL、IL-10 mRNA和蛋白在D组表达较最高,与其余各组比较差异有显著性(P<0.05),A组MAL、IL-10 mRNA和蛋白表达最低,B、C组经柴朴汤及抑制剂干预后MAL、IL-10mRNA和蛋白明显增加,与A组比较差异有显著性(P<0.05)。B组MALmRNA和蛋白与C组比较差异无显著性(P>0.05),B组IL-10m RNA和蛋白与C组比较差异有显著性(P<0.05)。Eotaxin、IL-4mRNA和蛋白在D组表达最弱,与其余组比较差异有显著性(P<0.05),A组Eotaxin、IL-4mRNA和蛋白最强,经柴朴汤及抑制剂干预后B、C组Eotaxin、IL-4mRNA和蛋白表达减弱,A组与B、C组比较差异有显著性(P<0.05)。B组Eotaxin、IL-4mRNA和蛋白与C组比较差异有显著性(P<0.05)。p-ERK1/2蛋白在D组表达最弱,与A、B组比较差异有显著性(P<0.05),A组p-ERK1/2蛋白明显增强,经柴朴汤及抑制剂干预后B、C组p-ERK1/2蛋白表达减弱,A组与B、C组比较差异有显著性(P<0.05)。C组与B组p-ERK1/2蛋白比较差异有显著性(P<0.05)。C组与D组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:1、MAL、P-ERK1/2参与哮喘病理发生发展过程;2、柴朴汤可能通过上调哮喘大鼠MAL表达,抑制ERK1/2信号通路,从而抑制哮喘气道炎症。