论文部分内容阅读
目的：感染并发症是急性胰腺炎诊治中极其常见的临床问题。在轻型急性胰腺炎(mild acute pancreatitis,MAP)中继发感染较为少见，其发生率低于1%，而在重症急性胰腺炎(SAP)约有40%～70%的病人发生继发感染，是最常见的死亡原因。胰腺感染细菌的来源主要是肠道细菌的移位。肠粘膜屏障功能损害被认为是引起肠道细菌及内毒素移位的重要机制，但临床上尚缺乏特效手段保护肠粘膜屏障，防止SAP后肠道细菌移位。近年来强调通里攻下的中医药辅助治疗重症急性胰腺炎取得明显效果，可减少继发感染，降低病死率。通里攻下代表药单味大黄以苦寒为本，“寒下法”为治则，研究证实可保护肠屏障，减少细菌移位。本实验旨在研究以“温里攻下”为治则的胰炎合剂对SAP大鼠肠粘膜屏障和肠道细菌移位的影响。方法: 选择健康Wistar大鼠，雌雄不限，体重250±30g ，共90只，随机分为假手术组（n=10）、重症急性胰腺炎模型组（n=20）、抗生素干预组(n=20)、单味大黄干预组（n=20）和胰炎合剂干预组（n=20）。通过向大鼠胰胆管内逆行注射5%牛磺胆酸钠(0.1ml/100g)制备成SAP模型，术后分别用氨苄青霉素 (8.93mg/100g，2次/24小时)、大黄水煎剂(1ml/100g，2次/24小时)或胰炎合剂(1ml/100g，2次/24小时)对干预组进行灌胃治疗，模型组<WP=4>给予生理盐水(1ml/100g，2次/24小时)。术后48小时处死大鼠，无菌打开动物腹腔，从下腔静脉采血2ml，将血标本置于无菌无热源试管中离心收集血浆，测定各组血浆内毒素水平；剪取小块肝组织及肠系膜淋巴结数枚，称重后分别匀浆，做细菌培养，观察匀浆体外培养后的细菌量、细菌移位率；处死动物后立即取回肠末段标本，剪成1mm×3mm小条块，用4%戊二醛固定，用作透射电镜检查，观察胰腺和末端回肠组织光镜或电镜下变化。应用统计学软件对数据进行分析。结果：假手术组有15%的肝脏和MLN组织细菌培养阳性, YH干预组细菌移位率为22.5%，DH干预组细菌移位率为30.0%，明显低于AB干预组的87.6%( P<0.01)和SAP组的90% ( P<0.01)， AB干预组和SAP组无差别（P>0.05）。 SAP组和AB干预组肝脏细菌移位量分别为3.60±2.18×103CFU/g和3.76±2.04×103CFU/g，明显高于SO组的1.75±1.12×103CFU/g ( P<0.01)，而YH干预组的细菌移位量为1.98±0.97×103CFU/g，明显低于AB干预组( P<0.01)；DH干预组的细菌移位量为2.21±1.14×103CFU/g，亦明显低于AB干预组( P<0.01)；YH干预组的细菌移位量低于DH干预组( P<0.05)，AB干预组和SAP组无差别（P>0.05）。SAP组和AB干预组MLN细菌移位量分别为5.84±3.67×103CFU/g和5.21±2.89×103CFU/g，明显高于SO组的1.75±1.12×103CFU/g( P<0.01)和YH干预组的2.09±1.25×103CFU/g( P<0.01)及DH干预组的2.98±1.67。YH干预组MLN细菌移位量低于DH干预组( P<0.05)，AB干预组<WP=5>和SAP组无差别（P>0.05）。YH干预组及DH干预组的血浆内毒素水平分别为0.097±0.064 Ku/L和0.216±0.078，明显低于AB干预组的0.842±0.205 Ku/L ( P<0.01)和SAP组的0.877±0.230 Ku/L ( P<0.01)， YH干预组的血浆内毒素水平低于DH干预组( P<0.05)，AB干预组和SAP组无差别（P>0.05）。YH干预组及DH干预组的回肠粘膜厚度、绒毛高度和陷窝深度与AB干预组和SAP组有明显差异( P<0.01)，而前两者差别不大( P>0.05)， AB干预组和SAP组亦无明显差异( P>0.05)。 SAP组和AB干预组胰腺间质和腺小叶炎症细胞浸润，间质水肿，小叶间隔甚至腺泡间隔增宽，有片状出血、坏死伴皂化斑形成。回肠粘膜固有层水肿伴炎性细胞浸润，中央乳糜管扩张，部分绒毛尖端上皮脱落。DH干预组和YH干预组胰腺亦有不同程度的片状坏死，伴粒细胞浸润，间质水肿，但程度较AB干预组和SAP组明显减轻。DH干预组和YH干预组回肠粘膜固有层轻度充血水肿，中央乳糜管扩张不明显，绒毛脱落不明显。SO组大鼠胰腺腺泡结构完整，间质内胰腺腺管和血管均未见异常；回肠绒毛结构完整，呈高柱状上皮，间质无水肿，未见炎症细胞浸润。电镜下观察SAP组和AB干预组回肠粘膜微绒毛稀疏脱落，排列紊乱，细胞内部分线粒体肿胀，细胞间紧密连接增宽。DH干预组和YH干预组回肠粘膜微绒毛排列整齐，略变短稀疏，细胞内线粒体肿胀，细胞间紧密连接增宽不明显。SO组大鼠回肠粘膜组织无明显病理改变。结论： 用5%牛磺胆酸钠胰胆管内逆行注射制备成SAP模型，成功率高，重复性好。口服抗生素治疗SAP<WP=6>无肠屏障保护作用，不能有效抑制肠道细菌及内毒素移位。胰炎合剂有明显减轻SAP时肠粘膜损害，保护肠粘膜屏障，抑制肠道细菌及内毒素移位的作用。胰炎合剂较单味大黄具有更强的抑制肠道细菌及内毒素移位的作用。