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人参(Panaxginseng C. A. Mey)是多年生草本植物，最早载于我国《神农本草经》，有“百草之王”之称。人参种植对土壤和环境条件要求较高，且连作障碍严重，病害泛滥。植物内生菌(Plant endophyte)是指定殖于植物各器官、组织或细胞中、并能与植物建立和谐联合关系的一类微生物，它们广泛存在于植物体内，经过与宿主植物长期的协同进化，建立了一种复杂、特殊的共生关系，人参内生菌广泛存在于健康人参组织内部，是其微生态系统的重要组成部分。本文通过对人参内生菌的分离、筛选及生物活性研究，探讨人参内生菌与人参病原菌的关系，并对人参内生菌作用于人参细菌性软腐病菌条件进行优化。以期对人参病害的生物防治提供参考，研究结果如下：
1.为了全面真实客观评估人参内生菌的多样性和资源开发的潜力,采用第二代高通量测序技术分析野生抚育模式(MCG)、农田栽参模式(FCG)及伐林栽参模式(DSGP)三种不同栽培模式下人参根部内生菌的丰度和多样性。研究发现，三种栽培模式下人参共有内生细菌OTUs108个(占比22.27%)，共有内生真菌OTUs218个(占比16.50%)。MCG野生抚育模式人参根部内生细菌和内生真菌的群落指数Chao1、ACE、Shannon指数值均是高于DSGP伐林栽参模式，而FCG农田栽参模式下这三种指数最低。FCG农田栽参模式Simpson指数最高。通过相对丰度分析发现，人参根部相对丰度最高的内生真菌类群为子囊菌门(Ascomycota)(＞80%)；内生细菌相对丰度最高的类群为变形菌门(Proteobacteria )((＞78%)。研究结果表明栽培模式显著影响人参内生菌的形成和多样性。
2.从人参新鲜根茎中共分离得到85株人参内生菌，其中真菌17株，细菌68株，从皮层分离得到40株，韧皮部分离得到31株，木质部分离得到14株。其中具有拮抗活性的共有32株，其中只对一种病原菌有拮抗效果的有7株，对两种及以上病原菌都可产生抑制生长作用的菌株有14株，可同时对所测的5种病原真菌都产生拮抗作用的菌株共8株，而对所测五种病原菌都能起到良好拮抗效果(抑菌率达到50%)的内生菌株仅有2株。
3.对筛选得到的菌株拮抗作用广，拮抗活性强的内生菌株进行分子生物学鉴定，发现具有拮抗活性的菌株多属芽孢杆菌属，M5菌株为芽孢杆菌属Bacillusamyloliquefaciens(解淀粉芽孢杆菌)，R3菌株为芽孢杆菌属Bacilluspumilus(短小芽孢杆菌)，F1菌株为芽孢杆菌属Bacillussubtilis(枯草芽孢杆菌)，R4菌株为芽孢杆菌属Bacillussafensis(沙福芽孢杆菌)，P1和M1菌株同为芽孢杆菌属Bacillusvelezensis(贝莱斯芽孢杆菌)，M2菌株为沙雷菌属Serratiaplymuthica(普城沙雷菌)。
4.对F1和M5作用于细菌性软腐病菌的拮抗条件进行初步优化表明：液体培养5d的F1菌液在温度28℃，pH=7时拮抗效果最佳抑菌环半径可达8.87mm；液体培养3d的M5菌液在最适温度30℃，pH=6.5，接种量为25%拮抗效果最佳，抑菌环半径可达5.91mm。
5.人参内生细菌F1对所测的8种人参根系分泌物的化学趋向性响应实验结果显示：F1对这8种物质都表现出了趋化作用，但对不同物质的化学趋向性响应程度存在显著差异：对L-谷氨酸、甘氨酸、L-鼠李糖、L-苏氨酸、D+岩藻糖、葡萄糖等6种物质都具有较强的趋化作用。而对L-丝氨酸的趋化作用较弱，对人参总皂苷的趋化作用最弱。
1.为了全面真实客观评估人参内生菌的多样性和资源开发的潜力,采用第二代高通量测序技术分析野生抚育模式(MCG)、农田栽参模式(FCG)及伐林栽参模式(DSGP)三种不同栽培模式下人参根部内生菌的丰度和多样性。研究发现，三种栽培模式下人参共有内生细菌OTUs108个(占比22.27%)，共有内生真菌OTUs218个(占比16.50%)。MCG野生抚育模式人参根部内生细菌和内生真菌的群落指数Chao1、ACE、Shannon指数值均是高于DSGP伐林栽参模式，而FCG农田栽参模式下这三种指数最低。FCG农田栽参模式Simpson指数最高。通过相对丰度分析发现，人参根部相对丰度最高的内生真菌类群为子囊菌门(Ascomycota)(＞80%)；内生细菌相对丰度最高的类群为变形菌门(Proteobacteria )((＞78%)。研究结果表明栽培模式显著影响人参内生菌的形成和多样性。
2.从人参新鲜根茎中共分离得到85株人参内生菌，其中真菌17株，细菌68株，从皮层分离得到40株，韧皮部分离得到31株，木质部分离得到14株。其中具有拮抗活性的共有32株，其中只对一种病原菌有拮抗效果的有7株，对两种及以上病原菌都可产生抑制生长作用的菌株有14株，可同时对所测的5种病原真菌都产生拮抗作用的菌株共8株，而对所测五种病原菌都能起到良好拮抗效果(抑菌率达到50%)的内生菌株仅有2株。
3.对筛选得到的菌株拮抗作用广，拮抗活性强的内生菌株进行分子生物学鉴定，发现具有拮抗活性的菌株多属芽孢杆菌属，M5菌株为芽孢杆菌属Bacillusamyloliquefaciens(解淀粉芽孢杆菌)，R3菌株为芽孢杆菌属Bacilluspumilus(短小芽孢杆菌)，F1菌株为芽孢杆菌属Bacillussubtilis(枯草芽孢杆菌)，R4菌株为芽孢杆菌属Bacillussafensis(沙福芽孢杆菌)，P1和M1菌株同为芽孢杆菌属Bacillusvelezensis(贝莱斯芽孢杆菌)，M2菌株为沙雷菌属Serratiaplymuthica(普城沙雷菌)。
4.对F1和M5作用于细菌性软腐病菌的拮抗条件进行初步优化表明：液体培养5d的F1菌液在温度28℃，pH=7时拮抗效果最佳抑菌环半径可达8.87mm；液体培养3d的M5菌液在最适温度30℃，pH=6.5，接种量为25%拮抗效果最佳，抑菌环半径可达5.91mm。
5.人参内生细菌F1对所测的8种人参根系分泌物的化学趋向性响应实验结果显示：F1对这8种物质都表现出了趋化作用，但对不同物质的化学趋向性响应程度存在显著差异：对L-谷氨酸、甘氨酸、L-鼠李糖、L-苏氨酸、D+岩藻糖、葡萄糖等6种物质都具有较强的趋化作用。而对L-丝氨酸的趋化作用较弱，对人参总皂苷的趋化作用最弱。