【摘 要】
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目的腧穴配伍针刺是基于中医理论体系,结合经络的循行规律及腧穴的功能和特性,通过中医辨证然后将两个或以上穴位同用,采用针法或灸法,以达到治疗疾病的目的。本研究选取失眠大鼠模型,采用不同腧穴配伍方法,进行针刺治疗,观察并对比大鼠松果体（conarium）中褪黑素（Melatonin,MT）的含量变化,研究不同腧穴配伍方法治疗失眠的效果。方法将60只正常SD大鼠随机分配为5组:空白组,模型组,治疗组1（
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目的腧穴配伍针刺是基于中医理论体系,结合经络的循行规律及腧穴的功能和特性,通过中医辨证然后将两个或以上穴位同用,采用针法或灸法,以达到治疗疾病的目的。本研究选取失眠大鼠模型,采用不同腧穴配伍方法,进行针刺治疗,观察并对比大鼠松果体（conarium）中褪黑素（Melatonin,MT）的含量变化,研究不同腧穴配伍方法治疗失眠的效果。方法将60只正常SD大鼠随机分配为5组:空白组,模型组,治疗组1（百会、神门）,治疗组2（百会、三阴交）,治疗组3（百会、非经非穴点）,12只/组,空白组给予常规喂养处理,其余4组,采用限制性固定方法持续15日,使用腹腔注射对氯苯丙氨酸（P-chlorophenylalanine,PCPA）混悬液的方法建立失眠模型,实验开始时,首先让每组大鼠自由活动24小时并记录其基础水平。在之后的5天中,连续每日对治疗组1,治疗组2,治疗组3这3组大鼠采用相应的穴位的针刺治疗。治疗结束后,每组大鼠进行24小时自发活动试验,采样后应用高效液液相色谱（High Performance Liquid Chromatography,HPLC）和实时荧光定量PCR分别检测外周血MT含量以及CNMT1和MT2 m RNA的水平。结果1、失眠模型的建立本研究采用戊巴比妥钠睡眠试验。空白组大鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间相较基础水平无显著差异（P＞0.05）。与造模之前相比,模型组,治疗组1,治疗组2,治疗组3这4组大鼠的睡眠潜伏期均高于模型建立之前;模型组的睡眠潜伏期相比空白组更长（P＜0.01）,并且睡眠时间相比空白组更短（P＜0.01）,提示造模成功。2、不同腧穴配伍针刺治疗后对大鼠活动度的影响给予不同腧穴配伍针刺治疗后检测每组大鼠24小时自发活动昼夜活动量的水平结果表明:与空白组相比,模型组大鼠白天活动量显著增加（P＜0.01）,夜间活动量显著减少（P＜0.01）。与模型组相比,治疗组1、治疗组2、治疗组3这3组日间活动量显著减少（P＜0.01）夜间活动量显著增加（P＜0.01）;与治疗组3相比,治疗组1、治疗组2日间活动量减少（P＜0.05）,夜间活动量增加（P＜0.05）,而治疗组1与治疗组2之间无统计学差异（P＞0.05）。检测大鼠休息期活动量,结果显示:不同腧穴配伍针刺治疗后,治疗组1、治疗组2、治疗组3组大鼠在24小时内的自发活动呈现与明暗周期重新同步的昼夜节律,与模型组相比,3个针刺治疗组大鼠的休息期活动量显著降低（P＜0.05）;与治疗组3相比,治疗组1与治疗组2休息期活动量降低,差异有统计学意义（P＜0.05）;治疗组1与治疗组2直接结果无统计学差异。3、不同腧穴配伍针刺治疗对大鼠外周血MT及松果体中MT m RNA水平的影响（1）研究表明针刺治疗能提高大鼠外周血MT蛋白的含量:HPLC检测结果显示针刺治疗组即治疗组1、治疗组2、治疗组3的松果体MT含量均显著高于模型组（P＜0.01）。治疗组1与治疗组2均高于治疗组3（P＜0.05）,而这两组之间无显著性差异（P＞0.05）。（2）不同腧穴配伍针刺治疗能提高大鼠SCN MT1、MT2m RNA的表达水平,QPCR检测结果显示:与空白组相比,模型组MT1和MT2m RNA的表达量显著降低（P＜0.01）;与模型组相比,治疗组1、治疗组2和治疗组3MT1和MT2m RNA的表达显著增加（P＜0.01）;治疗组1和治疗组2MT1和MT2 RNA的表达高于治疗组3（P＜0.05）;治疗组1和治疗组2之间MT1和MT2 m RNA的表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）,但是治疗组1有高于治疗组2的趋势。结论针刺治疗能有效改善失眠模型鼠的睡眠障碍,降低焦虑程度,通过增加外周血浆中的MT含量,提高松果体中MT1和MT2m RNA的表达水平,起到治疗失眠的作用,并且不同腧穴配伍方法的针刺治疗效果不一,验证了腧穴配伍是影响针灸治疗效果的重要因素,循经取穴可以一定程度提高针灸治疗的疗效。
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