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本文从以下两部分进行了阐述:
第一部分 苗药九仙罗汉接骨汤对SD大鼠胫骨骨折愈合中TGF-β1、BMP-2、bFGF蛋白及基因的动态表达
目的:通过检测苗药九仙罗汉接骨汤干预后的大鼠骨折模型骨痂组织中TGF-β1、BMP-2、bFGF蛋白及基因不同时相的表达,探究苗药复方九仙罗汉接骨汤加速骨折愈合的机理。
方法:将SD大鼠(SPF级,雌雄各半,鼠龄约8周,体重约220±20g)120只,行改良单皮质骨缺损(钻孔法)模型法造模成功后,随机分成接骨汤组、生理盐水组。接骨汤组在麻醉苏醒后即灌服九仙罗汉接骨汤,2ml/次,Bid,对照组灌服同体积生理盐水。造模后于1d、3d、7d、14d、21d、28d分别各处死动物10只,取造模处骨痂组织,按免疫组化技术(immunohistochemisity)和实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR, q-PCR)技术检测法分别检查转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)、骨形态发生蛋白-2(bonemorphogenetic protein-2,BMP-2)、碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblastgrowth factor, bFGF)蛋白及基因的动态表达的情况。经统计学软件SPSS20.0分析。
结果:1.骨痂组织中TGF-β1及TGF-β1mRNA表达的结果
1.1 TGF-β1表达接骨汤组平均光密度值(mean optical density, MOD)在骨折愈合过程中14~28d时显著强于生理盐水组,有统计学意义(P<0.01)。
1.2 TGF-β1mRNA表达接骨汤组在造模后第1~3d TGF-β1mRNA表达量与生理盐水组相当(P>0.05);在7d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.34倍,有差异性(P<0.05);在14d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.45倍,在21d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.85倍,在28d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.05倍,14~28d时组间相较均有明显差异(P<0.01)。
2.骨痂组织中BMP-2及BMP-2mRNA表达的结果
2.1 BMP-2表达接骨汤组MOD值在骨重建过程14~28d之间显著强于生理盐水组,有统计学意义(P<0.01)。
2.2 BMP-2mRNA表达接骨汤组在造模后第1~3d BMP-2mRNA表达量与生理盐水组相当(P>0.05);在7d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.63倍,在14d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.01倍,在21d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.45倍,在28d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.18倍,7~28d组间比较均有显著差异(P<0.01)。
3.骨痂组织中bFGF及bFGFmRNA表达的结果
3.1 bFGF表达接骨汤组MOD值在骨重建过程7~28d之间强于生理盐水组,有差异性(P<0.05),其中14~28d有显著差异性(P<0.01)。
3.2 bFGFmRNA表达接骨汤组在造模后第1~3d bFGFmRNA表达量与生理盐水组相当(P>0.05);在7d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.43倍,在14d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.48倍,在21d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.12倍,在28d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.16倍,7~28d组间比较均有显著差异(P<0.01)。
结论:苗药九仙罗汉接骨汤能够通过促进大鼠骨折模型骨折断端TGF-β1、BMP-2、bFGF蛋白及基因的表达,从而达到加速骨折愈合的作用。
第二部分 苗药九仙罗汉接骨汤治疗Colles骨折的临床疗效观察
目的:观察对比苗药九仙罗汉接骨汤和骨康胶囊内服配合手法整复、小夹板固定治疗Colles骨折的临床疗效,为苗药治疗Colles骨折提供临床依据。
方法:选取时间为2016年01月-2017年10月范围之内,贵阳中医学院第二附属医院骨二科门诊或住院病人中确诊为Colles骨折的患者且自愿加入本临床疗效随访者40例,均行手法整复加小夹板固定。随机分成接骨汤组、骨康胶囊组各20例。接骨汤组口服九仙罗汉接骨汤,组方为:仙桃草、九节茶、地罗汉,1天/剂,Tid,早中晚餐后1h温服,共4周;骨康胶囊组口服骨康胶囊,Tid,每次3粒,共4周;其余治疗均保持一致。对比两组治疗前后掌倾角、尺偏角、桡骨高度的变化、视觉模拟评分(Visual Analogue Scale,VAS)变化情况、桡骨远端骨折愈合评分系统(Radius Union Scoring System,RUSS)在不同时间段评价骨折愈合情况及最后的疗效、治疗后骨折愈合时间以及治疗后腕关节功能评价,并监测治疗全程安全性指标及不良反应。统计学软件SPSS20.0分析。
结果:1.接骨汤组、骨康胶囊组病人分别坚持服九仙罗汉接骨汤及骨康胶囊,在本研究中未出现严重的不良反应及不良事件。
2.接骨汤组、骨康胶囊组病人性别、年龄分布及手法复位前后两组患者掌倾角、尺偏角、桡骨高度比较后,临床观察可进行。
3.接骨汤组、骨康胶囊组病人整复后1周、2周、4周三个时段的掌倾角、桡骨高度、尺偏角相较均无差异(P>0.05),复位后骨折断端无再移位。
4.接骨汤组、骨康胶囊组病人治疗前及治疗后4周疼痛程度VAS评分比较无差异性(P>0.05);治疗后1、2周疼痛程度VAS评分有差异性P<0.05)。
5.接骨汤、骨康胶囊组病人治疗后1、6周RUSS评分相较无差异性(P>0.05);治疗后2、4周RUSS评分相较有差异性(P<0.05)。
6.接骨汤组、骨康胶囊组病人治疗后骨折愈合时间无差异性(P>0.05)。
7.接骨汤、骨康胶囊组病人治疗后Gartland-Werley评分分值比较有差异性(P<0.05); Gartland-Werley评分法评价疗效比较无差异性(P>0.05)。
8.接骨汤、骨康胶囊组病人治疗前后安全性指标均正常。
结论:苗药九仙罗汉接骨汤具有促进Colles骨折患者骨折愈合、减轻创伤后的疼痛、加快骨痂生长、改善骨重建后腕关节功能的效应。
第一部分 苗药九仙罗汉接骨汤对SD大鼠胫骨骨折愈合中TGF-β1、BMP-2、bFGF蛋白及基因的动态表达
目的:通过检测苗药九仙罗汉接骨汤干预后的大鼠骨折模型骨痂组织中TGF-β1、BMP-2、bFGF蛋白及基因不同时相的表达,探究苗药复方九仙罗汉接骨汤加速骨折愈合的机理。
方法:将SD大鼠(SPF级,雌雄各半,鼠龄约8周,体重约220±20g)120只,行改良单皮质骨缺损(钻孔法)模型法造模成功后,随机分成接骨汤组、生理盐水组。接骨汤组在麻醉苏醒后即灌服九仙罗汉接骨汤,2ml/次,Bid,对照组灌服同体积生理盐水。造模后于1d、3d、7d、14d、21d、28d分别各处死动物10只,取造模处骨痂组织,按免疫组化技术(immunohistochemisity)和实时荧光定量PCR(Real-time Quantitative PCR, q-PCR)技术检测法分别检查转化生长因子-β1(Transforming Growth Factor-β1,TGF-β1)、骨形态发生蛋白-2(bonemorphogenetic protein-2,BMP-2)、碱性成纤维细胞生长因子(Basic fibroblastgrowth factor, bFGF)蛋白及基因的动态表达的情况。经统计学软件SPSS20.0分析。
结果:1.骨痂组织中TGF-β1及TGF-β1mRNA表达的结果
1.1 TGF-β1表达接骨汤组平均光密度值(mean optical density, MOD)在骨折愈合过程中14~28d时显著强于生理盐水组,有统计学意义(P<0.01)。
1.2 TGF-β1mRNA表达接骨汤组在造模后第1~3d TGF-β1mRNA表达量与生理盐水组相当(P>0.05);在7d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.34倍,有差异性(P<0.05);在14d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.45倍,在21d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.85倍,在28d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.05倍,14~28d时组间相较均有明显差异(P<0.01)。
2.骨痂组织中BMP-2及BMP-2mRNA表达的结果
2.1 BMP-2表达接骨汤组MOD值在骨重建过程14~28d之间显著强于生理盐水组,有统计学意义(P<0.01)。
2.2 BMP-2mRNA表达接骨汤组在造模后第1~3d BMP-2mRNA表达量与生理盐水组相当(P>0.05);在7d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.63倍,在14d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.01倍,在21d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.45倍,在28d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.18倍,7~28d组间比较均有显著差异(P<0.01)。
3.骨痂组织中bFGF及bFGFmRNA表达的结果
3.1 bFGF表达接骨汤组MOD值在骨重建过程7~28d之间强于生理盐水组,有差异性(P<0.05),其中14~28d有显著差异性(P<0.01)。
3.2 bFGFmRNA表达接骨汤组在造模后第1~3d bFGFmRNA表达量与生理盐水组相当(P>0.05);在7d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.43倍,在14d时接骨汤组表达量是生理盐水组的1.48倍,在21d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.12倍,在28d时接骨汤组表达量是生理盐水组的2.16倍,7~28d组间比较均有显著差异(P<0.01)。
结论:苗药九仙罗汉接骨汤能够通过促进大鼠骨折模型骨折断端TGF-β1、BMP-2、bFGF蛋白及基因的表达,从而达到加速骨折愈合的作用。
第二部分 苗药九仙罗汉接骨汤治疗Colles骨折的临床疗效观察
目的:观察对比苗药九仙罗汉接骨汤和骨康胶囊内服配合手法整复、小夹板固定治疗Colles骨折的临床疗效,为苗药治疗Colles骨折提供临床依据。
方法:选取时间为2016年01月-2017年10月范围之内,贵阳中医学院第二附属医院骨二科门诊或住院病人中确诊为Colles骨折的患者且自愿加入本临床疗效随访者40例,均行手法整复加小夹板固定。随机分成接骨汤组、骨康胶囊组各20例。接骨汤组口服九仙罗汉接骨汤,组方为:仙桃草、九节茶、地罗汉,1天/剂,Tid,早中晚餐后1h温服,共4周;骨康胶囊组口服骨康胶囊,Tid,每次3粒,共4周;其余治疗均保持一致。对比两组治疗前后掌倾角、尺偏角、桡骨高度的变化、视觉模拟评分(Visual Analogue Scale,VAS)变化情况、桡骨远端骨折愈合评分系统(Radius Union Scoring System,RUSS)在不同时间段评价骨折愈合情况及最后的疗效、治疗后骨折愈合时间以及治疗后腕关节功能评价,并监测治疗全程安全性指标及不良反应。统计学软件SPSS20.0分析。
结果:1.接骨汤组、骨康胶囊组病人分别坚持服九仙罗汉接骨汤及骨康胶囊,在本研究中未出现严重的不良反应及不良事件。
2.接骨汤组、骨康胶囊组病人性别、年龄分布及手法复位前后两组患者掌倾角、尺偏角、桡骨高度比较后,临床观察可进行。
3.接骨汤组、骨康胶囊组病人整复后1周、2周、4周三个时段的掌倾角、桡骨高度、尺偏角相较均无差异(P>0.05),复位后骨折断端无再移位。
4.接骨汤组、骨康胶囊组病人治疗前及治疗后4周疼痛程度VAS评分比较无差异性(P>0.05);治疗后1、2周疼痛程度VAS评分有差异性P<0.05)。
5.接骨汤、骨康胶囊组病人治疗后1、6周RUSS评分相较无差异性(P>0.05);治疗后2、4周RUSS评分相较有差异性(P<0.05)。
6.接骨汤组、骨康胶囊组病人治疗后骨折愈合时间无差异性(P>0.05)。
7.接骨汤、骨康胶囊组病人治疗后Gartland-Werley评分分值比较有差异性(P<0.05); Gartland-Werley评分法评价疗效比较无差异性(P>0.05)。
8.接骨汤、骨康胶囊组病人治疗前后安全性指标均正常。
结论:苗药九仙罗汉接骨汤具有促进Colles骨折患者骨折愈合、减轻创伤后的疼痛、加快骨痂生长、改善骨重建后腕关节功能的效应。