【摘 要】
：
目的:证实Flotillin-1和Flotillin-2均促进肝癌细胞的转移和侵袭,并明确Flotillin-1和Flotillin-2在肝癌细胞中的相互调节作用。方法:1.采用免疫组织化学染色和生存分析证实Flotillin-1和Flotillin-2在肝癌中的作用。2.构建敲低Flotillin-1和Flotillin-2的肝癌细胞,验证敲低效果。Transwell实验检测敲低Flotilli
论文部分内容阅读
目的:证实Flotillin-1和Flotillin-2均促进肝癌细胞的转移和侵袭,并明确Flotillin-1和Flotillin-2在肝癌细胞中的相互调节作用。方法:1.采用免疫组织化学染色和生存分析证实Flotillin-1和Flotillin-2在肝癌中的作用。2.构建敲低Flotillin-1和Flotillin-2的肝癌细胞,验证敲低效果。Transwell实验检测敲低Flotillin-1或Flotillin-2的肝癌细胞迁移和侵袭能力,western blotting检测EMT相关蛋白的表达。3.在肝癌组织和肝癌细胞系中检测Flotillin-1和Flotillin-2的蛋白和mRNA表达水平,统计分析二者是否具有相关性。4.在肝癌细胞中敲低或过表达Flotillin-1或Flotillin-2检测另一蛋白的mRNA和蛋白表达水平的变化,明确二者间是否存在相互调节作用。5.Co-IP实验检测在肝癌细胞中Flotillin-1和Flotillin-2是否相结合形成异聚体。6.CHX抑制剂作用下检测敲低Flotillin-1或Flotillin-2蛋白的稳定性。在MG132作用下,检测Flotillin-1和Flotillin-2表达降低后另一蛋白的泛素化水平,明确Flotillin-1和Flotillin-2相互调节的途径。结果:1.Flotillin-1和Flotillin-2在肝癌组织中高表达,尤其伴有淋巴结转移时显著增高。2.在肝癌细胞中敲低Flotillin-1或Flotillin-2的表达,均抑制肝癌细胞的迁移和侵袭,同时对EMT相关蛋白具有相似的调节作用。3.在肝癌组织和肝癌细胞系中,Flotillin-1和Flotillin-2在mRNA和蛋白水平上的表达呈正相关。4.在肝癌细胞中Flotillin-1和Flotillin-2相互结合形成异聚体。5.干扰Flotillin-1的肝癌细胞中,Flotillin-2的蛋白含量降低而mRNA表达水平无明显改变,而过表达Flotillin-1后,肝癌细胞中的Flotillin-2不管是蛋白水平还是mRNA水平均无明显改变。反之亦然。6.干扰Flotillin-1的肝癌细胞中,Flotillin-2的降解速度增快,稳定性降低,泛素化水平增高。同样的,下调Flotillin-2的表达后,Flotillin-1稳定性降低,泛素化水平增高。结论:1.Flotillin-1和Flotillin-2在淋巴结转移的肝癌患者中显著增高。2.Flotillin-1和Flotillin-2可以抑制肝癌的迁移和侵袭。3.在肝癌细胞和肝组织中Flotillin-1和Flotillin-2的表达水平呈正相关。4.Flotillin-1和Flotillin-2相互结合形成复合体。5.只有在下调Flotillin-1表达的情况下Flotillin-2蛋白水平降低,反之亦然。6.Flotillin-1和Flotillin-2是通过增加泛素化水平的方式相互调节。
其他文献
普惠金融人群信贷供给“最后一公里”之难,一直是信贷领域长期存在的问题。在国家和党中央号召银行零售业务转型的大背景下,助贷业务应时而生,它是针对中小微弱客群融资困难等问题的一种新型信贷服务方式,也是解决普惠金融的有效手段之一。助贷机构凭借在数据、场景、科技能力等方面的优势,成为了银行等传统金融机构与借贷客户之间的桥梁,承担着链接B端（Busines s,企业用户）与C端（Consume,个人用户）的
随着近十几年来股份制银行的飞速发展、互联网金融的飞速扩张,外资、合资银行的持续涌进,传统的政府控股的地方银行所面临的压力前所未有。在面临着银行市场被抢占、客户被抢夺、份额被侵占等前所未有的严酷环境下,农商银行开始智能化转型,于是现在的柜员更多的是处理智能柜台无法完成的非标准业务,对柜员的特殊业务处理能力提出了新的需求;大零售模式转型,开启全员营销全新模式,柜面作为风险把控的第一关,柜员风险意识要求
随着市场经济的快速发展,企业之间对于优秀人才的竞争也愈发激烈。并且当前社会上突出的知识型员工越来越关注自身的职业发展,大部分人才在职业发展过程中,不再仅仅停留在对薪资待遇及工作环境的要求层面,而是更加注重自身价值的实现与职业发展空间的大小。所以,对于企业来讲,实行全面有效的职业生涯管理则十分必要。D粮食公司是一家以生物工程技术为依托,集食品研发、生产加工及销售为一体的食品科技公司。其核心员工为食品
目的:本研究采用1H NMR代谢组学技术,通过对消化性溃疡模型小鼠的胃黏膜、十二指肠组织样本代谢物的分析,结合组织病理学观察和药物成分分析,探讨加味黄连汤对消化性溃疡小鼠黏膜损伤修复作用和有效药理成分,以及其对胃黏膜、十二指肠组织的代谢响应机制。方法:40只SPF级KM小鼠按随机数字表法分成空白组、模型组、西药组和中药组。除空白组外,其余三组均通过束缚-冷应激法诱导消化性溃疡模型。造模成功后,中药
子宫内膜组织蜕膜化是胚胎着床、胎盘发育、胎儿生长和分娩等整个生殖过程中的关键事件。蜕膜化的子宫内膜组织不仅可以为胚胎着床提供合适的微环境,还能够保护同种半异体的胎儿不受母体免疫细胞的攻击,同时还可以促进胎盘的形成,并在胎盘形成前为胎儿提供足够的营养物质。子宫内膜组织蜕膜化一旦发生障碍,在整个妊娠期都可能会引起不利的妊娠结局,胚胎植入异常、胎盘发育受损、妊娠丢失等。子宫内膜异位症、复发性流产、抗磷脂
背景:梅毒在我国呈现日渐流行趋势,为了探究厦门地区梅毒螺旋体分子分型特征和抗生素耐药相关基因,我们采用两种分型技术对2016-2017期间收集的梅毒螺旋体（Treponema pallidum,T.pallidum）分离株进行分子分型和耐药相关基因的研究。方法:在2016-2017期间,我们共收集78份临床样本,其中49份tp0574基因阳性的样本纳入研究。随后采用ECDC和MLST两种分型技术进
在全球经济放缓的情况下,现代企业中把“目标人群的满意和传播是长期赢得市场,获取价值的关键”作为一切商务执行的主要指导思想。管理中,需要对组织的各类资源进行有效的计划、组织、领导和控制。控制的职能是对组织内部的管理活动及其效果进行校对和改善,以保证设定的目标以及为此拟定的计划能够可以实现,它使得管理工作作为一个闭路系统、一种连续过程。全面质量管理体系的最理想的实践目标就是“以顾客为中心”,各个环节都
随着科技的进步与经济的发展,呼叫中心行业已经从最早期的电话中心发展到了如今新一代的呼叫中心。顾客的需求从早期的解决问题,到如今要求越来越优质的顾客体验,市场经济已经从公司主导向客户主导转化。伴随着互联网技术的发展与大数据运用的普及,互联网+时代下的呼叫中心行业出现了一类具有新型服务形态的企业——IT技术型呼叫服务中心。在传统的呼叫中心服务的基础上同时要保证产品技术的支持,本文的研究对象——惠普公司
放化疗是癌症治疗的最常用方法,其作用机制是通过诱导细胞产生剧烈的DNA损伤来促进对肿瘤细胞的杀伤作用。然而放化疗耐受的产生严重影响了患者的预后,导致了患者疾病复发和死亡。目前,异常DNA损伤修复被认为是放化疗耐受的最主要原因。因此,了解细胞DNA损伤修复的分子机制,有助于靶向抑制DNA损伤修复,增强肿瘤放化疗敏感性。多发性内分泌肿瘤Ⅰ型综合征（multiple endocrine neoplasm
随着社会的进步,环境污染引起的健康问题越来越受到人们的重视。PM2.5由于其粒子直径小,可经呼吸系统进入肺泡,经肺血交换从而进入血液循环,对人体产生危害。PM2.5对后代心脏的发育影响已有较多研究报道,但其中以多环芳烃为主的有机毒性成分对心脏影响却少有研究。为探索PM2.5有机成分对胎儿心脏发育的作用,以及其对胎儿成年后的心脏疾病易感性影响,本研究对小鼠在孕前3周和孕期3周的期间进行了本地收集的P