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研究目的高级别（FIGO 3级）子宫内膜样腺癌（Endometriod endometrial carcinoma,EEC）发病率相对较低,肿瘤异质性明显,到目前为止仍然缺少足够的证据明确与预后相关的生物学行为。2013年癌症基因图谱计划（The Cancer Genome Atlas,TCGA）根据多组学研究（包括全外显子二代测序、转录和蛋白组学等研究比较）提出了子宫内膜癌四种分子分型,包括POLE超突变、微卫星高度不稳定、TP53突变等多种遗传学改变都可诱发EEC的发生。本研究纳入70例高级别EEC病例,旨在对其临床病理特征进行总结并探讨FIGO 3级EEC分子分型的临床应用价值,以期指导日常的临床病理实践。研究方法本研究通过一定的纳入排除标准收集高级别EEC患者临床病理信息,对目标病例进行病理形态学观察,在进一步明确FIGO 3级EEC的临床病理诊断之后,选择肿瘤组织丰富的蜡块切取蜡卷以提取DNA,采用NGS技术检测基因突变情况,IHC方法检测MMR、p53蛋白表达情况,参考“子宫内膜癌TCGA分子分型”体系,将FIGO3级EEC运用四层分类法优先顺序,模拟“TCGA分子分型”方案依次将本组病例进行分子分型,比较分析高级别EEC不同分子改变尤其是模拟TCGA分子分型后的结果,与患者临床病理特征（包括预后）之间的关系。同时对基于NGS检测技术和IHC检测方法进行分子分型时结果的一致性作比较分析。研究结果1临床病理特点70例高级别EEC患者发病年龄29-67岁,中位年龄54.5岁,42例患者已绝经,所有患者诉有月经不规律病史。手术采用“全子宫+双附件切除+清扫盆腔淋巴结”的方式。术后见肿瘤直径0.5-9cm（但有2例大体检查显示粘膜粗糙,未见明显瘤块）;对于发病部位而言,13例为子宫体下段,57例为子宫体其它部位。本组病例中33例肿瘤浸润深度超过了1/2肌层、28例脉管内见有癌栓、20例患者伴有淋巴结转移。临床分期方面,采用国际妇产科联合会（International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO）2009年的分期标准对所有患者重新复核术后分期。Ⅰ期患者:29例,Ⅱ期:14例,Ⅲ期:24例,Ⅳ期:3例。在术后辅助治疗方面,辅助放化疗:41例,仅辅以化疗:18例,仅辅以局部放疗:3例,有8例未行辅助治疗;伴发疾病方面,有高血压（2-3级）病史者8例,伴发糖尿病者2例;恶性肿瘤家族史方面,有直系家属患癌者6例。2基于NGS检测结果的分子特点2.1模拟TCGA分型的分子分型结果高级别EEC各分子亚型比例分别为POLE超突变组28.6%（20/70）,MSI-H组37.1%（26/70）,TP53突变组14.3%（10/70）,其他类型组20.0%（14/70）,在其它类型组中存在KRAS基因突变者4例,CTNNB1基因突变2例,这6例病例均存在互斥现象,即未检测到患者同时伴有KRAS和CTNNB1基因突变。2.2多重分子改变在POLE突变患者中,分别有8例同时伴有TP53突变,有2例微卫星状态为MSI-H,有1例同时伴CTNNB1突变;MSI-H型患者中,有2例同时伴TP53突变,2例同时伴KRAS突变;TP53突变组患者中,有1例同时检测到KRAS突变,1例同时有CTNNB1突变。总的来说,TP53基因的突变比较容易与POLE超突变型、MSI-H型分子特征重叠在一起,占比50.0%（10/20）。3.基于NGS技术检测和IHC方法进行分子分型的一致性比较3.1 MSI和MMR检测采用NGS技术检测肿瘤组织MSI-H的病例占40.0%（28/70）,IHC方法检测到MMR的比例为32.9%（23/70）,两种不同方法检测到的结果总的一致率为92.9%（65/70）,一致性程度很强（Kappa值=0.831）。3.2 TP53基因突变和p53免疫组化检测采用NGS技术检测肿瘤组织TP53基因突变的病例占28.6%（20/70）,IHC检测到p53异常表达的比例为25.7%（18/70）,两种不同方法检测到的结果总的一致率为91.4%（64/70）,一致性程度较强（Kappa值=0.784）。4.高级别EEC模拟TCGA方案分子分型后与临床病理特征（包括预后）之间的关系不同分子亚型高级别EEC的临床病理特征间的差异无统计学意义。随访方面,70例患者均获得完整的随访结果,7例患者因病死亡,5年无病生存率为88.4%。单因素生存分析显示FIGO 3级EEC患者发生淋巴结转移、临床FIGO分期较晚（Ⅲ-Ⅳ期）的5年总生存率（overall survival,OS）低,差异有统计学意义（p<0.05）。脉管侵犯、肌层浸润深度以及分子分型等其他的临床病理特征与预后均无统计学差异（p>0.05）。研究结论1.在高级别子宫内膜样腺癌临床诊疗实践中,可尝试采用NGS技术运用四层分类法优先顺序模拟TCGA方案分为四个亚型:POLE突变型、MSI-H型、TP53突变型及其他类型。2.高级别子宫内膜样腺癌中,TP53基因的突变容易与其它基因改变重叠在一起而表现为多重分子改变的特征。3.高级别子宫内膜样腺癌的分子分型可采用NGS、IHC等不同检测方法达到高度一致的结果,对于判断较困难的病例可采用多种方法综合判断。4.高级别子宫内膜样腺癌总体预后较好,5年无病生存率为88.4%,发生淋巴结转移、FIGO分期较晚（Ⅲ-Ⅳ期）的患者五年无病生存率降低。其他的临床病理特征及分子分型情况与预后的关系有必要进一步扩大样本量研究。