天然橡胶在工业中存在着广泛的用途,其是一种顺-1,4-异戊二烯的高分子聚合物。巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)的天然橡胶的主要来源,其有着产胶量高、易收获等众多优点被广泛栽培来用于天然橡胶的生产。具有高度保守的WRKYGQK氨基酸序列的WRKY转录因子是广泛存在于高等植物中的转录因子超级家族。WRKY转录因子在植物的生长发育、次生代谢调控及胁迫应答等方面起着重要的作用。橡胶树中至少含有82个WRKY转录因子基因,但目前对WRKY转录因子在橡胶树中的作用,特别是WRKY转录因子在天然橡胶生物合成中的调控的了解还很少。本研究克隆了Hb WRY55,发现HbWRKY55可以与橡胶合成过程中的关键基因HbSPPP1、HbHRT2的启动子结合,克隆了HbWRKY55启动子并对其功能进行初步分析。研究结果为深入的了解WRKY在天然橡胶生物合成中的调控机制奠定了基础。主要结果如下:1.HbWRKY55在胶乳中表达量最高,随后依次为叶片、树皮、根和花。JA、SA下调HbWRKY55的表达,ET上调HbWRKY55的表达,ABA处理对HbWRKY55的表达量影响不明显。2.HbWRKY55转录因子定位在细胞核内。3.HbWRKY55可以与HbSRPP1、HbHRT2的启动子结合,激活HbSRPP1、HbHRT2的启动子的表达,推测HbWRKY55可能在天然橡胶的合成过程中起到了调控作用。4.克隆了HbWRKY55的启动子,通过在线分析发现该启动子不仅具有真核生物启动子的基本元件,如增强子元件CAAT-box、核心序列TATA-box等,除此之外还存在着激素调控的应答元件,如赤霉素反应元件GARE-motif、P-box;水杨酸响应元件TCA-element等激素应答元件。通过实验发现外源激素GA、SA可以抑制HbWRKY55启动子的活性。