束缚-浸水应激（RWIS）是一种复合应激模型，能够给大鼠造成生理和心理强度较大的有害刺激。在该应激模型中，可以在较短时间内激怒大鼠，使其体温降低以及胃肠机能发生紊乱，导致胃酸的分泌量增多、产生急性胃黏膜损伤等。由于RWIS可以模拟临床上由创伤、手术或者脓毒症引起的胃溃疡，模拟应激性胃溃疡的发病原因，所以被广泛应用于应激性胃溃疡的研究中。应激性胃溃疡是指创伤、手术后和全身性严重的感染时所发生的急性胃炎，主要症状为胃黏膜的糜烂、出血和溃疡，严重时会危及人的生命。c-fos基因是一种即刻早期基因，细胞在受到外界刺激时能够瞬间表达c-Fos蛋白，所以c-Fos蛋白常被用来检测激活的神经元。实验室前期研究表明，在RWIS条件下，大鼠脑干NTS、DMV、AP以及下丘脑PVN、SON的c-Fos蛋白和星形胶质细胞特异性标记物GFAP的表达明显增加，说明脑干和下丘脑的这些核团参与了RWIS过程。蓝斑（LC）和中缝大核（NRM）之间存在着相互的纤维联系，且与脑干NTS、DMV和下丘脑相关核团存在直接或间接的突触联系。在功能上两者均参与了胃肠功能的调节，且与应激反应密切相关。但关于LC和NRM是否参与RWIS导致胃黏膜损伤，尚未见报道。ERK1/2信号通路包括ERK1和ERK2，ERK1/2被磷酸化激活后，由细胞质转移至细胞核内，之后与cAMP反应元件结合，从而调节c-fos、Jun-B等的表达，我们的研究发现在RWIS过程中，不同脑区神经元内的c-Fos蛋白表达显著增多。近年来的一些研究表明，ERK1/2信号通路与炎症、应激反应的调控关系密切，被认为是细胞信号传递通路的交汇点，那么，作为c-Fos蛋白表达的上游调控分子ERK1/2是否参与RWIS过程，起何作用，尚未见报道。因此，我们提出以下几个问题：　　1.LC、NRM是否参与了RWIS过程？若LC、NRM参与RWIS过程，神经元和星形胶质细胞的相互关系如何？　　2.ERK1/2信号通路是否参与RWIS过程？若ERK1/2信号通路参与RWIS过程，ERK1/2信号通路是否影响应激性胃溃疡的产生？为了解决以上问题，实验设计如下：　　实验研究一：将大鼠随机分为对照组（0h）和应激组（0.5h、1h、2h、3h、5h）用免疫组织化学和Western Blot的方法检测神经元c-Fos表达、星形胶质细胞GFAP表达，以探讨LC、NRM是否参与RWIS过程。　　实验研究二：侧脑室注射神经元c-Fos表达抑制剂ASO作为以及星形胶质细胞特异性表达抑制剂L-AA，观察RWIS1h时，LC、NRM内神经元c-Fos表达和星形胶质细胞GFAP表达的的变化，及对应激性胃溃疡产生的影响。探讨RWIS条件下，LC、NRM星形胶质细胞和神经元之间的相互关系。　　实验研究三：将大鼠随机分为对照组（0h）和应激组（0.5h、1h、3h、5h）用免疫组织化学和Western Blot的方法检测p-ERK1/2的表达，探讨ERK1/2信号通路是否参与应激性胃溃疡过程；侧脑室注射ERK1/2信号分子抑制剂PD98059，观察RWIS3h时，神经元c-Fos表达、星形胶质细胞GFAP表达及胃溃疡指数影响，以探讨ERK1/2信号通路在应激性胃黏膜损伤中的作用。　　本实验研究结果：1.与对照组相比，随着RWIS时间的增加，LC、NRM内c-Fos的表达有不同程度的增加。LC、NRM内对照组的星形胶质细胞胞体小、突起不明显；而随着应激时间的增加，星形胶质细胞胞体明显增大、突起变粗变大，GFAP表达量明显增加，阳性反应明显增多。表明LC、NRM内神经元和星形胶质细胞均被激活，参与了RWIS过程。　　2.ASO为神经元c-Fos蛋白表达的抑制剂，L-AA为星形胶质细胞特异性表达抑制剂。在侧脑室注射ASO，RWIS1h后发现，LC、NRM内神经元c-Fos表达明显减少，同时星形胶质细胞GFAP表达也显著减少；注射L-AA，RWIS1h后，星形胶质细胞GFAP表达减少，同时神经元c-Fos蛋白的表达也明显减少。ASO和L-AA能明显降低胃溃疡指数。表明RWIS过程中，LC、NRM内神经元和星形胶质细胞间的激活存在着相互调节的关系。　　3.在RWIS过程中，以p-ERK1/2作为ERK1/2信号通路被激活的标志。与对照组相比，在RWIS过程中，p-ERK1/2的表达数量明显增加，在3h时达到最大，表明ERK1/2信号通路也参与了RWIS过程。注射ERK1/2信号通路特异性抑制剂PD98059后，与生理盐水对照组相比，RWIS3h后，胃溃疡指数明显降低。说明ERK1/2信号通路的激活能促进应激性胃溃疡的产生。