【摘 要】
：
SET结构域（domain）是在果蝇三个调节因子Su（var）3-9、Enhancer of zeste、Trithorax羧基末端的一段共同序列,含有SET domain的蛋白同属于SET家族蛋白。已有研究表明SET家族蛋白通过甲基化修饰组蛋白或者非组蛋白参与基因的表达调控,并参与到胚胎发育、肿瘤和炎症相关疾病的发生发展中。SETD4是课题组前期在研究内毒素休克的发生机制时利用蛋白质组学技术筛选
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（No.81072425）； 国家自然科学基因项目（No.81471909）； 广东省自然科学基金重点项目（2015A030311031）；
论文部分内容阅读
SET结构域（domain）是在果蝇三个调节因子Su（var）3-9、Enhancer of zeste、Trithorax羧基末端的一段共同序列,含有SET domain的蛋白同属于SET家族蛋白。已有研究表明SET家族蛋白通过甲基化修饰组蛋白或者非组蛋白参与基因的表达调控,并参与到胚胎发育、肿瘤和炎症相关疾病的发生发展中。SETD4是课题组前期在研究内毒素休克的发生机制时利用蛋白质组学技术筛选出的差异表达蛋白。文献报道在乳腺癌细胞中下调SETD4的蛋白抑制乳腺癌细胞的增殖,在卤虫中SETD4参与细胞周期调控。在课题组前期的初步研究中发现SETD4蛋白在巨噬细胞内呈全细胞分布,主要分布在胞浆;Western blot结果显示SETD4在多种细胞内均有表达。在巨噬细胞中给予细菌脂多糖（LPS）刺激时,SETD4表达量上调,炎性细胞因子释放增加,提示SETD4蛋白可能参与LPS诱导的炎性因子的释放过程。SETD4在肝细胞中是否有表达并参与炎性因子的产生?LPS激活细胞增强SETD4转录的信号通路及转录因子有哪些?本课题拟以AML12细胞为研究对象,通过观察LPS刺激AML12细胞后SETD4表达变化,干扰SETD4表达对促炎因子IL-6、TNF-α转录的影响,探讨SETD4在LPS诱导的AML12细胞的炎症中是否发挥促进作用;进一步利用信号通路抑制剂、荧光素酶报告基因及生物信息分析等方法研究介导LPS刺激SETD4表达上调的信号通路及转录因子,初步探讨内毒素刺激细胞调控SETD4转录的机制。本课题已取得的实验结果如下:1.LPS刺激AML12细胞后,促炎因子IL-6、TNF-α转录升高,同时SETD4的转录与表达均增高;2.进一步通过SETD4 siRNA片段干扰AML12细胞SETD4蛋白表达,LPS刺激后促炎因子IL-6、TNF-α的转录水平显著下调;3.LPS刺激AML12细胞后,促炎信号通路p38 MAPK、ERK1/2、JNK与IκBα均在LPS刺激30 min后发生显著活化;分别用p38 MAPK、ERK1/2、JNK与IκBα的信号通路抑制剂预处理AML12细胞,ERK与JNK通路抑制剂不影响SETD4的转录,而p38 MAPK与NF-κB抑制剂减少SETD4的转录;4.通过构建SETD4启动子不同片段的荧光素酶报告基因验证SETD4启动子的活性实验发现,包含SETD4启动子的最短序列是-1216 bp～-55bp,以及具有关键转录因子结合的序列是-1216 bp～-568 bp。5.生物信息学分析SETD4的启动子片段,通过比对及分析找到调控SETD4转录的可能转录因子是CEBPα、CEBPβ、RelA和AP-1等。基于上述研究结果得出如下结论:AML12细胞中,LPS通过激活p38 MAPK通路与NF-κB通路,促进SETD4的转录与表达,上调的SETD4通过正向调控IL-6、TNF-α的产生参与了炎症反应过程;在此过程中调控SETD4转录的转录因子可能有CEBPα、CEBPβ、RelA和AP-1。本研究结果为深入探讨SETD4的转录调控机制奠定了基础。
其他文献
第一部分代谢综合征及其组分与糖尿病痛性周围神经病的相关性研究背景糖尿病周围神经病变（Diabetic Peripheral Neuropathy,DPN）是糖尿病（Diabetes Mellitus,DM）最常见的慢性并发症,患病率约50%,其中高达25%会出现神经性疼痛,即糖尿病痛性周围神经病（Painful Diabetic Peripheral Neuropathy,PDPN）。与非痛性糖尿
研究背景:骨质疏松（Osteoporosis）是当今世界临床上极为常见的代谢性骨病综合征。据不完全统计,目前全球约有2亿骨质疏松症患者,其中欧美国家患者数约为7500万,而我国则达到了 7000至8000万的患者数量。随着年龄的增长,骨质疏松症的发生率不断攀升,而当今社会人口老龄化问题日趋严峻,骨质疏松症及骨质疏松所引起的骨折患者数量也在成倍地增加,骨质疏松合并骨折后给患者及其家庭、社会带来了沉重
研究背景及目的龋病是一种牙体硬组织慢性进行性破坏的疾病。尽管我国居民的口腔健康保健意识已得到提高,但患龋状况仍呈上升态势。变异链球菌（Streptococcus mutans,S.mutans）是最主要的致龋菌。生态菌斑学说指出,牙菌斑生物膜中占优势的致龋菌代谢产生过多的酸,导致局部硬组织脱矿是龋病发生的最直接原因。现有的防龋药物包括了氟化物,它能够促进牙釉质的再矿化,但它并不具有明显的抗致龋菌作
研究背景目前骨质疏松症是一个严重的全球性公共卫生问题。近年来,越来越多的流行病学研究表明,出生体重可能是影响骨骼生长的重要决定因素之一。出生体重的遗传度高达87%,骨密度（bone mineral density,BMD）的遗传度高达75%-83%,我们推测出生体重和BMD之间可能存在共同的遗传机制。先前的GWAS已经鉴定出90个与腰椎（lumbar spine,LS）BMD相关遗传位点和87个与
目的:内毒素耐受和缺氧是脓毒症发生时机体生理异常的两种常见现象,两者往往同时存在,影响机体的免疫功能。HIF-1α是内毒素和缺氧环境激活的缺氧诱导因子（HIF）家族中的一种。本研究通过探究缺氧环境对发生内毒素耐受的THP-1细胞分泌功能、吞噬功能及抗原提呈功能的影响,以及HIF-1α mRNA的表达水平,旨在探讨缺氧如何影响发生内毒素耐的THP-1细胞的免疫功能及可能的分子机制。方法:1.通过建立
目的:间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）是一种多能干细胞,它能分化为脂肪、骨、软骨等多种组织,人体受到创伤时可活化并迁移至受伤部位参与炎症反应及组织修复过程。而肿瘤可以被看做是一种“永不愈合的创伤”,现有研究表明,MSCs可以被招募到肿瘤微环境中,发挥促进肿瘤生长并使肿瘤发生免疫逃逸。在结直肠癌中,也有报道MSCs能促进结直肠癌的发生和进展。因此,研究MSCs如
研究背景及目的非酒精性脂肪肝（Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD）常被认为是代谢综合征（胰岛素抵抗、肥胖、高脂血症）的肝脏表现,全球发病率高达20%～30%,主要包括非酒精性单纯性脂肪肝（nonalcoholic simple fatty liver,NAFL）和非酒精性脂肪性肝炎（nonalcoholic steatohepatitis,NASH）。其
糖尿病是一种涉及多器官、多系统的慢性疾病,其病变范围广泛、病变特征复杂多变。随着人们生活方式的变化,糖尿病的发病率也在不断升高。其中,糖尿病导致的肝脏和肾脏病变属于糖尿病微血管并发症。尽管目前针对糖尿病的治疗多种多样,但是没有一种药物能够完全逆转糖尿病并发症的进展。因此深入探究糖尿病并发症的发病机制,为临床治疗提供更合理的治疗方案是我们迫切需要解决的问题。晚期糖基化终产物（advanced gly
背景及目的:肝细胞癌是发病率及死亡率位居前列的恶性肿瘤之一。肝细胞癌易于复发和转移,对现有的化疗药物及靶向药物易产生抵抗性和耐药性,故药物治疗尚难取得令人满意的疗效。因此,从中药和天然产物中寻找特异性低毒药物,以及寻找新的药物靶标,是肝癌药物治疗的新策略。临床上将苦参碱与其他化疗药物联合用于肝癌的治疗,取得了一定的疗效,但其具体作用机制尚未明确。本文拟从体内外对苦参碱抗肝细胞癌转移的作用及相关机制
1.研究意义全膝关节置换术是治疗晚期膝关节关节炎的有效方法之一,TKA的目标是减轻疼痛,改善功能和稳定性,延长植入假体的生存寿命,提高患者整体满意度。最佳的下肢力线校准是影响临床疗效满意度的重要因素之一,初次全膝关节置换术术后下肢力线校准异常可导致假体松动、关节不稳定和过早翻修。已有大量文献证实,术后最理想的下肢机械轴线应置于中立位0°±3°。然而,传统人工全膝关节置换术使用胫骨髓外定位工具和股骨