论文部分内容阅读
目的缺血再灌注损伤在临床较为常见,防治措施众多,但多数效果不确切,本实验旨在探讨缺血预处理不同时间方案对肢体缺血再灌注损伤保护作用的差异性,选择合理的缺血预处理时间,为临床开展缺血预处理技术提供充足的理论依据。方法取40只健康SPF级SD大鼠,随机分成5组(n=8)。术前禁食12h,禁水2h。腹腔10%水合氯醛麻醉后分离显露腹主动脉下段和下腔静脉,在肠系膜下动脉与双髂动脉分叉间用微血管夹阻断腹主动脉血流2h、复通血流2h为缺血再灌注损伤模型。假手术组(A组,仅行开腹,分离腹主动脉不阻断血流);缺血再灌注组(B组,夹闭腹主动脉缺血2h后再灌注2h);C、D、E组:分别阻断腹主动脉1、5和10min,再灌注1、5和10min,如此重复3个循环后再进行2h缺血2h再灌注。各组均在实验程序结束复通血流后经下腔静脉采血34ml,3000r/min离心15min后-80℃保存。采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定MDA浓度,黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性,使用双抗体一步夹心酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)水平,观察各组氧化/抗氧化指标及炎症因子表达的差异性。实验结果采用SPSS19.0统计软件进行分析,计量资料以x_±s表示,所有分组均进行K-S检验、方差齐性检验,组间两两比较采用LSD法单因素方差分析。结果1.与A组比较,B组的SOD活力下降,MDA含量升高,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D、E组的SOD活力升高,MDA含量下降,其中C组与B组比较的差异无统计学意义(P>0.05),D、E组与B组比较差异有统计学意义(P<0.05);C、D、E进行组间比较,E组的SOD活力最高、MDA含量最低,C组SOD活力最低、MDA含量最高,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。2.与A组比较,B组的IL-6、TNF-α、IL-10含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C、D、E组的IL-6、TNF-α含量明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);C、D、E进行组间比较,各数值均呈递增趋势,IL-6的含量D组和C组比较、E组和D组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。TNF-α含量D组和C组差异无统计学意义(P>0.05),E组和D组差异有统计学意义(P<0.05)。IL-10含量各组间进行比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论1.缺血预处理对缺血再灌注诱发的氧化损伤存在保护作用,在IprC1、5、10min/3个循环分组内显示IprC时间与其保护作用呈平行关系。2.机体在缺血预处理时会发生炎症反应,IprC时间的增加促进了炎症因子的表达和蓄积,显示IprC在肢体缺血所致的炎症反应上无明显保护作用,甚至可增加肢体缺血最终造成全身性炎症反应。3.本实验显示,1min/3个循环缺血预处理方案发挥的抗氧化损伤作用无统计学意义,诱导的炎症反应轻微。10min/3个循环方案抗氧化损伤作用最强,但是炎症反应最重,不适宜选用。5min/3个循环方案有明显的抗氧化损伤作用,炎症反应适中,综合来看临床选作缺血预处理策略较为适宜。