定心藤化学成分及抗炎活性研究

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定心藤(Mappianthusiodoides)系茶茱萸科定心藤属植物,又名甜果藤、黄马胎、假丁公藤等,主要分布在我国西南各省以及越南北部,是一味瑶、壮、傣等少数民族常用药材。其根及老藤正是瑶药“十八钻”中的铜钻,具有通经活络、驱风祛湿等功效,主治黄疸型肝炎、风湿痹痛等。研究表明,定心藤含有生物碱、萜类等化学成分,其中以吲哚类生物碱最为丰富。前期预实验表明定心藤粗提物具有显著的抗炎活性。为了更全面地了解其化学成分,探索抗炎活性的物质基础,进而促进定心藤的药用开发,本实验以粗膏的抗炎活性为导向,对活性部位的化学成分进行系统分离,并对分离得到的单体进行抗炎活性研究。本课题运用多种色谱分离手段,结合现代波谱学方法,从定心藤抗炎活性部位分离鉴定了 30 个化合物。结构分别鉴定为:tetrahydroalstonine pseudoindoxyl-5-one(1)、5α-carboxytetrahydroalstonic acid(2)、3α,5α,21β-tetrahydrodeoxycordifoline lactam(3)、3β,5α,21β-tetrahydrodeoxycordifoline lactam(4)、1-methyl-β-carboline-4-carboxylic acid(5)、rauniticine-allo-oxindole B(6)、5α-羧基四氢鸭脚木碱(7)、喜果苷(8)、1,2-dihydro-1-oxo-β-carboline(9)、1,2,3,4-tetrahydro-1-oxo-β-carboline(10)、1,2,3,4-tetrahydro-1,3,4-trioxo-β-carboline(11)、(7S,8R)-4-hydroxy-5’-methoxy-4’,7-epoxy-8’,9’-dinor-8,3’-neolign-7’-carboxylic(12)、(+)-(7R,8S,7’E)-4-hydroxy-7,4’-epoxy-8,3’-neolign-7’-ene-9,9’-diol-ethyl ether(13)、(7S*,8R*,8’S*-4,4’,9-trihydroxy-7,9’-epoxyligan-7’-one(14)、(7S,8R)-4-hydroxy-3,5’-dimethoxy-4’,7-epoxy-8’,9’-dinor-8,3’-neolign-7’-carboxylic(15)、(7R,8S)-3’-methoxy-4,9,9’-trihydroxy-4’,7-epoxy-8,3’-neolignan(16)、cedrusinin(17)、4,9-dihydroxy-3,5’-dimethoxy-4’,7-epoxy-8,3’-neolignan-9’-yl acetate(18)、(-)-(7R,8S,7’E)-4-hydroxy-3,5’-dimethoxy-7,4’-epoxy-8,3’-neolign-7’-ene-9,9’-diol-ethylet:her(19)、salicifoliol(20)、(-)-glaberideI(21)、(+)-表松脂酚(22)、ligballinol(23)、(7S,7’S,8R,8 ’R)-松脂酚(24)、(+)-mediaresinol(25)、(R)-(-)-mellein methyl ether(26)、3-羟基-β-大马酮(27)、blumenolA(28)、blumenol A acetate(29)、(1S,3S,5R,6R,9R)-megastigman-7-ene-3,9-diol-5,12-epoxide(30)。其中化合物 1-4、12-14等7个为新化合物,化合物5为新天然产物。通过体外小胶质细胞活性抑制试验来评估粗提物和单体的抗炎活性。在不影响小胶质细胞存活率的前提下,粗提物Fr.E和Fr.E3对小胶质细胞N9活化有显著的抑制作用,IC50分别为26.40 μg/mL和21.94 μg/mL,与阳性对照物米诺环素(Mino IC50=25.35 μg/mL)相当;化合物12-30等19个化合物中,16、17、27-29等5个化合物对小胶质细胞BV-2活化有显著的抑制作用,并且在其发挥抑制作用的浓度范围内不影响小胶质细胞存活率,其中化合物27的半数抑制浓度(IC50)小于1μM,比阳性对照布洛芬(IBU IC50=24.78 μM)高 24 倍以上。
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