【摘 要】
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目的:探究卵巢癌细胞来源的外泌体对卵巢癌的生长和卵巢癌免疫微环境的影响。方法:体外培养小鼠卵巢癌细胞ID8,使用超速离心法制备细胞上清液来源的外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和免疫印迹对外泌体进行鉴定。对C57BL/6J（C57）小鼠腹腔注射荧光染料DIR染色的外泌体,利用小动物成像仪在不同时间点观察外泌体在体内的生物分布。将C57小鼠分为两组造模,分别预注射外泌体和磷酸缓冲液（phosph
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目的:探究卵巢癌细胞来源的外泌体对卵巢癌的生长和卵巢癌免疫微环境的影响。方法:体外培养小鼠卵巢癌细胞ID8,使用超速离心法制备细胞上清液来源的外泌体,通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析和免疫印迹对外泌体进行鉴定。对C57BL/6J（C57）小鼠腹腔注射荧光染料DIR染色的外泌体,利用小动物成像仪在不同时间点观察外泌体在体内的生物分布。将C57小鼠分为两组造模,分别预注射外泌体和磷酸缓冲液（phosphate buffered solution,PBS）后再使小鼠荷瘤,观察肿瘤生长情况并通过流式细胞、免疫荧光和酶联免疫吸附实验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）等实验技术探究小鼠体内免疫成分的改变。在体外通过外泌体和树突状细胞（dendritic cells,DC）的相互作用以及T细胞功能实验,验证外泌体能否直接或间接激活T细胞的功能。结果:卵巢癌细胞ID8来源的外泌体被成功制备,外泌体呈现具有明显膜结构的碟杯形,达到峰浓度的直径为137.6 nm且高表达特异性蛋白标志物Tsg101、CD81和CD9。卵巢癌细胞ID8来源的外泌体具有网膜靶向性。预注射外泌体的实验组荷瘤小鼠具有更小的肿瘤负荷和更长的生存时间,在脾脏和网膜具有更多的CD3+T细胞,并且网膜部位的CD4+和CD8+T细胞亚群比例均升高。实验组小鼠脾脏单核髓源性抑制细胞（monocytic myeloid-derived suppressor cells,M-MDSC）比例低于预注射PBS的对照组小鼠。实验组网膜和脾脏的CD8+T细胞表达更多的颗粒酶B,但实验组网膜高表达程序性死亡配体1（programmed death ligand 1,PD-L1）。此外,实验组小鼠的外周血γ干扰素（interferon-gamma,IFN-γ）浓度高于对照组。体外实验结果表明,外泌体能够被DC摄取,并促进DC分化,单独的外泌体或未经外泌体刺激的DC均不能诱导T细胞产生颗粒酶B和IFN-γ,而经外泌体刺激的DC能够诱导T细胞产生颗粒酶B和IFN-γ。结论:卵巢癌细胞来源的外泌体能够通过DC的摄取加工激发T细胞的抗肿瘤免疫,从而抑制卵巢癌的生长,延长生存期。
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【目的】半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Cysteinyl aspartate specific proteinase,caspase）包含caspase-1、caspase-4和caspase-11等,各种原因导致细胞内炎症小体活化,活化后的caspase剪切Gasdermin-D蛋白（GSDMD）的C端和N端结构域的连接区,释放N端（GSDMD-N）,该结构域可以结合膜磷脂并在膜上打孔破坏细胞膜,分泌
目的:草酸钙肾结石能够诱发肾脏炎症反应和损伤,从而进一步促进肾结石的形成和发展,损害肾脏功能,但其中潜在的分子机制目前仍未阐明。我们通过研究SIRT1调控草酸钙结晶引起的代谢异常及炎症损伤来揭示其在肾结石发生发展中的作用。方法:首先通过腹腔注射构建了肾草酸钙结晶造模组（Gly）与SIRT1过表达组（Gly+SRT1720）小鼠模型,收集小鼠肾脏行GC-MS非靶向代谢组检测差异代谢物。然后分析了原代
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目的:研究薯蓣皂苷在白介素-1β（Interleukin-1β,IL-1β）诱导的软骨细胞炎症及手术建立的大鼠骨性关节炎模型中的保护作用,并探究此过程中薯蓣皂苷发挥作用的潜在分子机制。方法:体外实验中,本研究使用IL-1β诱导大鼠软骨细胞的炎症,并使用不同浓度的薯蓣皂苷对其进行干预,通过CCK-8实验探究不同浓度薯蓣皂苷对细胞活性的影响。同时,通过Western-blot实验、荧光定量PCR实验以
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