NSCs移植对全横断脊髓损伤大鼠运动功能及NTFs表达的影响

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[目的]:探讨神经干细胞移植对全横断脊髓损伤(SCI)大鼠后肢运动功能及其脊髓内神经营养因子表达的影响。[方法]:取成年雌性SD大鼠(180-220g)30只,随机分为:假手术组,脊髓全横断损伤(于T8,9椎骨之间全横断脊髓)7天和14天组和神经干细胞移植(在T8,9椎骨之间全横断脊髓后用明胶海绵吸附神经干细胞填充到全横断处)7天和14天组共5组,每组6只动物。分别于7天和14天对大鼠行运动功能的Basso Beattie Bresnahan(BBB)评分。取每组6只动物中的1只灌注,固定,切片,观察干细胞移植后在脊髓内的存活迁移情况。每组6只动物中另5只动物用Western Blot分析脊髓内NGF,BDNF,NT-3,NT-4的表达变化,用生物凝胶成像系统成像及Synaptic Gene Tool软件进行分析,测定阳性染色区带4种营养因子的光密度值。采用单因素的方差分析及LSD-q检验进行显著性检验。[结果]1.大鼠的BBB评分在手术后7天组和干细胞移植7天组分别为0.8和2.2分;而,14天手术组和干细胞移植组分别达到3.0和6.6分。即神经干细胞移植组大鼠的BBB评分较脊髓全横断组有明显提高,运动功能得到明显改善。2、移植后的NSCs在脊髓内存活,并有迁移。3.Western Blot结果显示:全横断术后7天、14天,NGF,BDNF,NT-4的表达和假手术组相比较都没有明显差异(P=0.549,0.958,0.183,0.868,0.374,0.685),但NT-3的表达比假手术组明显降低(P=0.000,0.001)。NSCs移植7天后,NGF的表达比对应的手术组明显升高(P=0.001);BDNF的表达有所下降,但结果没有显著性差异(P=0.153);NT-3和NT-4的表达都没有明显变化(P=0.521,0.621)。NSC移植后14天,NGF的表达还是比对应的手术组高,但结果没有显著性差异(P=0.078);BDNF的表达明显降低,结果有显著性差异(P=0.032);NT-3和NT-4的表达没有显著变化(P=0.108,0.621)。[结论]1.神经干细胞移植入大鼠全横断损伤脊髓能明显改善动物后肢运动功能。2.移植的干细胞在损伤部位能存活,迁移。3.神经干细胞移植促进NGF上调,BDNF下调,而对NT-3,NT-4无明显影响,提示神经干细胞移植改善大鼠后肢运动功能可能与NGF,BDNF的表达变化有关。
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