[目的]预测鹦鹉热嗜衣原体（Chlamydophila psittaci,Cps）半胱氨酸脱硫酶CPSIT₀959的模拟结构,并进行其相关的功能性研究。[方法]利用SWISS-MODEL同源建模的方法分析和模拟CPSIT₀959的结构。提取Cps 6BC菌株DNA作为模板,设计特异性引物,运用PCR技术从Cps 6BC基因组中扩增CPSIT₀959基因,并构建p ET-30a-CPSIT₀959原核表达载体,然后转化到宿主菌E.coli BL21中,IPTG诱导His-CPSIT₀959重组蛋白表达,Western blotting分析和鉴定表达产物。进一步用Ni-NTA亲和层析法纯化重组蛋白,BCA法测定蛋白浓度。用该重组蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,间接ELISA法检测免疫小鼠血清中重组蛋白多克隆抗体的效价,并以制备的多克隆抗体为一抗,采用间接免疫荧光法分析内源性CPSIT₀959蛋白在He La细胞中的定位情况。根据半胱氨酸脱硫酶的脱硫反应机制,检测硫化物的产生来证实其具有脱硫酶的活性。[结果]分析模拟出了CPSIT₀959蛋白的三维结构;成功构建了p ET-30a-CPSIT₀959原核表达载体,其测序结果与Genbank上登录序列完全一致,并表达和纯化较稳定的重组蛋白;将纯化好的CPSIT₀959重组蛋白免疫BALB/c雌性小鼠,低速离心收集血清,利用间接ELISA法检测其抗体效价高达1:512000。在Cps感染He La细胞48h后采用间接免疫荧光法观察到CPSIT₀959的分布特征与主要外膜蛋白MOMP相似,而与包涵体膜蛋白Inc A的分布模式完全不同。根据半胱氨酸脱硫酶的脱硫反应机制,检测并证实原核表达并纯化的CPSIT₀959蛋白具有半胱氨酸脱硫酶的活性,能催化L-半胱氨酸分解产生硫化物,可能参与了衣原体内铁硫簇的生物合成。[结论]1.成功克隆表达了His-CPSIT₀959,该蛋白可能定位在Cps包涵体内;2.CPSIT₀959具有半胱氨酸脱硫酶的活性,能催化L-半胱氨酸分解产生硫化物,可能参与了衣原体内铁硫簇的生物合成。