论文部分内容阅读
小鼠非手术法胚胎移植相对手术法胚胎移植的成功率较低,这制约了非手术法胚胎移植的广泛应用。但与手术法相比,非手术法简便快捷、不易污染、费用低,且能对小鼠损伤小,无需专业的手术器械。本实验从麻醉剂种类、激素调节、假孕鼠天数、移植器械的材质、移植管径、管长、弧度、模拟移植、移入液体和空气体积、移入胚胎数量和移植方法等方面对非手术法进行改进,改善传统的非手术胚胎移植方法,提高了胚胎移植的成功率。在麻醉剂实验中,不同麻醉剂和不麻醉组的差异均不显著(P>0.05)。2.5d和3.5d假孕鼠的手术法移植成功率差异显著(P<0.05),非手术移植成功率的差异不显著(P>0.05),2.5d假孕鼠的手术法和非手术法移植效率差异显著(P<0.05),3.5d假孕鼠的非手术法移植效率没有显著提高。在小鼠进行胚胎移植之后,两组小鼠分别皮下注射0.1ml20ug/ml的雌激素和孕酮,补充孕酮的移植成功率为35.7%;补充雌激素的小鼠只有一只发生了妊娠,其他均未妊娠。采用玻璃管和PTFE管的移植成功率分别为55.9%和72.4%,差异显著(P<0.05);同样采用PTFE管,管径为600μm和750μm组的移植管的产仔率为72.7%和54.2%,差异显著(P<0.05),450μm组的产仔率70.5%与其它两组差异均不显著;移植管的长度分1.5cm、2.0cm、2.5cm和3.0cm四组,产仔数分别为60.4%、64.0%、71.1%和57.7%,四组差异均不显著(P>0.05)。体外培养胚胎的移植,将1-细胞胚胎、2-细胞胚胎体外培养至囊胚阶段(E3.5d)移植到2.5d假孕鼠体内,IVF胚胎体外培养至囊胚阶段移植到3.5d的假孕鼠体内。结果表明手术法与非手术法差异均不显著(P>0.05)。本实验改进了传统的非手术法胚胎移植,提高了移植成功率,与手术法效率相当。且非手术法胚胎移植符合实验动物伦理原则。重要的是,它为人类、牛和其他大动物的胚胎移植提供了研究模型。