【摘 要】
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目的:通过Catwalk步态技术、在体微电极阵列技术及激光多普勒脑血流检测技术,并结合组织形态学的方法初步探索电针预处理诱导大脑中动脉闭塞模型（Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO）大鼠脑缺血耐受的效应及其机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为电极埋置和多普勒脑血流检测两大组,每大组又分为正常组、模型组、电针组三个亚组。各组分别在不同时间点进行相应电针预刺激
【基金项目】
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《基于神经血管单元研究针刺诱导脑缺血耐受的效应》（编号：17ZR1427500）；
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目的:通过Catwalk步态技术、在体微电极阵列技术及激光多普勒脑血流检测技术,并结合组织形态学的方法初步探索电针预处理诱导大脑中动脉闭塞模型（Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO）大鼠脑缺血耐受的效应及其机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为电极埋置和多普勒脑血流检测两大组,每大组又分为正常组、模型组、电针组三个亚组。各组分别在不同时间点进行相应电针预刺激、MCAO造模、指标检测等处理。实验检测指标包括:1.Bederson改进神经缺损评分;2.Cat Walk步态分析;3.神经电生理学检测;4.多普勒脑血流检测;5.TTC染色及免疫组化。结果:依据纳入和排除标准,最终纳入大鼠为每组10只。其中电极埋置组（正常组4只、模型组5只、电针组4只）,多普勒组（正常组6只、模型组5只、电针组6只）。1、Bederson改进神经缺损评分:造模后MCAO模型大鼠（模型组、电针组）出现明显神经功能缺损体征,且与正常组存在明显统计学差异（P＜0.05）。造模后3h、24h,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠,Bederson改进神经缺损评分均呈下降趋势,电针组下降多于模型组（P＞0.05）,且均与正常组有差异（P＜0.05）。2、Cat Walk步态结果显示:（1）平均运动速度和持续时间:MCAO造模后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠运动速度较正常组明显减慢（P＜0.05）,而持续时间增加（P＜0.05）。电针组运动速度大于模型组,持续时间小于模型组,有统计学差异（P＜0.05）。（2）支撑基数:MCAO造模后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠前肢、后肢支撑基数均呈上升趋势,模型组大鼠后肢支撑基数明显高于正常组,有统计学差异（P＜0.05）。（3）平均压强:MCAO造模后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠四肢平均压强均明显下降,与正常组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）,模型组和电针组,差异不明显（P＞0.05）。（4）爪印面积:MCAO造模后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠两后肢爪印面积均减小,与正常组相比,模型组两后肢下降明显,电针组右后肢下降明显,差异有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,电针组左后肢下降趋势小,差异有统计学意义（P＜0.05）;MCAO模型（模型组、电针组）大鼠两前肢爪印面积和正常组差异不明显（P＞0.05）。（5）最大接触面积:MCAO造模后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠健侧（右侧）前肢和后肢最大接触面积明显下降,与正常组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）,患侧（左侧）前肢和后肢最大接触面积与正常组差异不明显（P＞0.05）;模型组和电针组相比,四肢最大接触面积差异均不显著（P＞0.05）。（6）单脚站立时间:MCAO造模后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠四肢单脚站立均有所增加,与正常组相比,模型组增加较明显,差异有统计学意义（P＜0.05）;电针组增加小于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）。3、纹状体区spike发放:MCAO造模后,模型大鼠spike发放频率比率下降,但电针组spike发放高于模型组。4、激光多普勒检测结果:MCAO造模后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠脑血流量明显降低,与正常组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;再灌注后,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠脑血流量有所回升,模型组回升较小,与正常组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;造模后,与正常组相比,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠脑血流变化量明显较大,差异有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,电针组变化较小,差异有统计学意义（P＜0.05）。5、TTC染色显示:正常脑组织染为深红色,缺血组织为白色;脑梗死体积百分比显示,MCAO模型（模型组、电针组）大鼠梗死体积明显较大,与正常组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;与模型组相比,电针组梗死体积百分比较小,差异有统计学意义（P＜0.05）。6、免疫组化:MCAO模型（模型组、电针组）大鼠缺血灶边缘区域VEGF、CD34、突触素P38表达较高,与正常组相比,差异有统计学意义（P＜0.05）;电针组大鼠缺血灶边缘区域VEGF、CD34、突触素P38表达高于模型组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:1、电针预处理可改善MCAO大鼠Bederson改进神经缺损评分,促进患侧肢体运动功能的康复;2、电针预处理可诱导脑内缺血耐受,增加缺血组织边缘区域VEGF、CD34的表达,改善缺血区域血供,增加缺血区域再灌注的血流量,减少梗死体积,减轻缺血后脑功能损伤程度;3、电针预处理可增加MCAO大鼠缺血组织边缘区域突触素P38的表达,并调节MCAO大鼠缺血侧纹状体区域动作神经元数目及其活跃程度;4、电针预处理可能通过增加VEGF、CD34的表达,改善缺血局部血管分布,通过增加突触素P38的表达,促进突触可塑性变化。
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