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目的:本实验通过观察过氧化物酶体增殖激活物受体(peroxisomeproliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)和血管生成素样蛋白4(angiopoietin-likeprotein4,Angptl4)在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠肺组织中的变化,探讨PPAR-γ与Angptl4在重症胰腺炎病情的发展过程中的作用及关系,从而进一步探究重症急性胰腺炎时肺损伤的发病机理,同时观察清胰汤的治疗作用,为临床上中西医结合治疗重症急性胰腺炎提供进一步的理论基础。 方法:健康雄性SPF级SD大鼠56只,每组8只,随机分为7个组:模型组(SAP组),假手术组(SO组),GW9662(PPAR-γ拮抗剂)干预组(GW组),罗格列酮(PPAR-γ激动剂)干预组(ROSI/ROZ组),地塞米松治疗(抗炎药)组(DEX组),清胰汤(中药)治疗组(QYT组),清胰汤与地塞米松联合组(Q+D)。造模的方法:用1ml注射器经十二指肠乳头内侧胰胆管处逆行注入1.5%脱氧胆酸钠(注射用量:1ml/kg)。SO组:打开腹腔后,仅灭菌手术器械轻轻的翻动胰腺几次。GW9662干预组(按剂量:5mg/kg,浓度:1mg/ml)、罗格列酮干预组(按剂量:5mg/kg,浓度:1mg/ml)、地塞米松组(按剂量:10mg/kg,浓度:5mg/ml)此三组造模后立刻注射治疗药物一次;地塞米松组在造模后6h和12h分别再次静脉给药,共给药三次。清胰汤组在造模之前0.5h,于胃管灌入中药清胰汤,然后于造模后6h和12h再次灌入中药,每次剂量:10ml/kg。联合组中的地塞米松和清胰汤的给药和处理方式同前,但两者的剂量都减半,分别为:5mg/kg;5ml/kg。造模后24h剖杀大鼠,取肺组织及动静脉血。肺组织以及胰腺组织储存于10%福尔马林固定液中待用(病理切片)。应用真空干燥法进行大鼠肺组织湿/干比值的监测,采集大鼠动脉血进行血气分析测定、大鼠血清淀粉酶含量的测定,ABC-双抗体夹心法测定大鼠血清中TNF-α的浓度,RT-PCR检测检测肺组织中PPAR-γ mRNA和Angptl4mRNA基因表达水平,采用蛋白印迹技术检测肺组织中PPAR-γ和Angptl4蛋白的表达水平。 结果:与假手术组相比较,SAP组大鼠的血清AMY、肺组织湿/干比值、血清TNF-α、肺组织中Angptl4 mRNA和蛋白表达水平均明显增高,而动脉血氧分压和PPAR-γmRNA及蛋白表达水平均显著降低,胰腺和肺组织病理结果显示损伤更加显著,在统计学上具有一定意义(P<0.05)。与SAP组相比罗格列酮处理组的胰腺、肺组织病理损伤明显减轻,肺组织Angptl4和PPAR-γ表达水平明显上升;而GW9662处理组表现出不同程度的降低,在统计学上具有显著差异(P<0.05)。与SAP组比较,地塞米松组、清胰汤组、清胰汤联合地塞米松组的血清AMY、肺组织湿/干比及TNF-α、肺组织中Angptl4 mRNA及蛋白表达水平都有不同程度的降低,而动脉血氧分压、PPAR-γ mRNA及蛋白表达水平都有一定程度的上升,胰腺、肺组织病理结果显示损伤程度有所减轻,在统计学上具有一定意义(P<0.05)。 结论:应用1.5%的去氧胆酸钠经胰胆管内逆行注射后,大鼠肺脏充血水肿,说明重症急性胰腺炎大鼠模型的制备比较稳定,胰腺、肺组织病理损伤较为明显。发生SAP时PPAR-γ和Angptl4在mRNA及蛋白水平表达的变化在肺组织损伤中均起到重要的保护作用。地塞米松具有抑制炎性介质和细胞因子表达和分泌的作用;清胰汤在SAP的治疗上有着独特的优势,能够起到祛除积滞、清热解毒、祛邪扶正的作用,在改善肺功能方面,能够与西药相互配合、取长补短,共同发挥作用。