【摘 要】
：
目的基于缺血性脑卒中“气虚血瘀络阻”的病机理论,在前期对新安医学益气活血通络法代表方脑络欣通的研究基础上,通过建立大鼠右侧中动脉脑缺血再灌注（MACO/R）模型,采用益气活血通络法、益气法和活血通络法及其代表方药进行干预,观察不同中医治法对大鼠缺血侧海马SHH信号通路SHH、Ptch1和Gli1三个SHH通路蛋白的影响,探讨益气活血通络法干预局灶性脑缺血损伤的作用机制,以期进一步为该法及代表方的临
【基金项目】
：
安徽省第十三批 115 产业创新团队“针药结合防治脑病产业创新团队”项目（皖人才办[2020]4 号）；
论文部分内容阅读
目的基于缺血性脑卒中“气虚血瘀络阻”的病机理论,在前期对新安医学益气活血通络法代表方脑络欣通的研究基础上,通过建立大鼠右侧中动脉脑缺血再灌注（MACO/R）模型,采用益气活血通络法、益气法和活血通络法及其代表方药进行干预,观察不同中医治法对大鼠缺血侧海马SHH信号通路SHH、Ptch1和Gli1三个SHH通路蛋白的影响,探讨益气活血通络法干预局灶性脑缺血损伤的作用机制,以期进一步为该法及代表方的临床推广应用和开发提供实验依据。方法实验共选用体重在300±20g范围的SD雄性大鼠135只,随机数法分为5大组（假手术组、模型组、益气活血通络法组、益气法组、活血通络法组）,每组各27只,各大组下再分3d、7d、14d三个亚组各9只。改良线栓法建立大鼠右侧中动脉脑缺血再灌注（MACO/R）模型,插线2h后再灌注,通过Zea Longa评分标准对造模后大鼠神经功能缺损体征进行评分,筛选模型。益气活血通络法组、益气法组、活血通络法组按照既往药效学结果分别计算药量,每天两次定时灌胃给药,模型组与假手术组造模术后以等量生理盐水于同一时间点灌胃,分别于给药3d、7d、14d后进行心脏内灌注和开颅取脑,剥离海马组织标本。Western-Blot法检测各组大鼠缺血侧海马SHH蛋白的表达,蛋白条带图片使用Image J软件分析,相对表达量取SHH蛋白与GAPDH灰度值的比值;免疫组化Envision二步法分别检测各组大鼠缺血侧海马DG区Ptch1、Gli1蛋白表达,图片采用image J软件对平均吸收光密度（OD）值进行统计分析。测得计量资料使用Mean±S表示,IBM SPSS Statistics24.0软件统计分析,多组间多时间点数据进行重复测量方差分析比较,同一时间不同组之间则再次进行单因素方差分析,LSD法进行两两比较,P＜0.05或P＜0.01被认为具有统计学差异性。统计图统一使用Graph Pad Prism7绘制,统计表统一为Office 2019制作。结果（1）Western-Blot检测结果显示:与同时间假手术组相比,3d、7d、14d模型组SHH蛋白相对表达量显著增加（P＜0.01）,随时间增长呈上升趋势。与同时间点模型组比较,益气活血通络法组各时间点SHH蛋白的相对表达量均明显增加（P＜0.01）;益气法组各时间点相对表达量均高于同时间点模型组（P＜0.05）;活血通络法组3d和14d组蛋白相对表达量高于同时间点模型组（P＜0.05）,7d则与模型组无统计学差异（P＞0.05）。与各时间点益气法组和活血通络法组相较,益气活血通络法组3d和7d蛋白表达增加（P＜0.01）,14d与益气法组和活血通络法组差异无统计学意义（P＞0.05）。益气活血通络法组、益气法组和活血通络法组SHH蛋白表达在3d、7d、14d均处于上升状态。（2）免疫组化检测结果显示:（1）Ptch1蛋白在缺血侧海马DG区神经细胞和内皮细胞的胞膜与胞浆中均有表达。假手术组仅有少量表达,平均吸收光密度值偏低。模型组在7d时达峰值,14d有所下降,与同时间点假手术组相比,3d差异无统计学意义,7d和14d模型组明显高于假手术组（P＜0.05）。益气活血通络法组Ptch1蛋白表达以3d为峰值,7d、14d呈下降趋势,与同时间点模型组比较,益气活血通络法各组平均吸收光密度均明显升高（P＜0.01）。益气法组各时间点均高于同时间模型组（P＜0.01）,以7d为峰值;活血通络法组在3d的时间点上与模型组相比差异无统计学意义,7d和14d高于模型组（P＜0.05）,7d活血通络法组平均吸收光密度达峰值。再灌注3d,益气活血通络法组与益气法组、活血通络法组相比Ptch1蛋白表达显著增加（P＜0.01）;再灌注7d,益气活血通络法组明显高于活血通络组（P＜0.05）,但与益气法组间无统计学差异（P＞0.05）;再灌注14d,益气活血通络法组与益气法组、活血通络法组三组间差异无统计学意义（P＞0.05）。（2）Gli1蛋白则主要在缺血侧海马DG区神经细胞和内皮细胞的胞核与胞浆中表达。假手术组少量表达,平均吸收光密度值偏低。与同时间点假手术组相比,模型组Gli1蛋白表达在各时间点均明显增加（P＜0.01）,7d达峰值,14d有稍许下降。益气活血通络法组平均吸收光密度随时间的增长而呈现上升趋势,14d最高,各时间点均显著高于同时间点模型组（P＜0.01）。益气法组在各时间点均高于模型组（P＜0.01）,以7d为峰值;活血通络法组各时间点均高于同时间点模型组（P＜0.05）,在7d达峰值。益气活血通络法Gli1蛋白表达在各时间点均显著高于益气组和活血通络组（P＜0.05）。结论益气活血通络法及其代表方脑络欣通显著增强海马或海马DG区SHH信号通路SHH、Ptch1、Gli1蛋白的表达,可能通过SHH经典信号通路促进脑组织缺血性损伤的修复,同时佐证了SHH信号通路参与调节缺血性脑卒中损伤,而益气活血通络法较单纯使用益气法或活血通络法效果更佳。
其他文献
目的从Orem理论中辅助-教育系统入手,探讨指导并教会患者穴位按摩的方法,在急性神经性耳鸣患者中的应用效果,与常规护理做对比,观察临床治疗效果,从而总结出较为优越的护理方案,提高患者在住院期间的满意度,为专科专病临床护理提供新思路。方法选取2021年7月至2021年12月于云南省某三甲医院耳鼻咽喉科44例急性神经性耳鸣的患者为研究对象,将符合纳入/排除标准的患者按办理入院时间的顺序,运用随机数字表
目的基于“子午流注学说”,以ICU患者为研究对象,探讨冰茶灵洗剂行口腔护理的最佳使用时机和使用频次,为ICU患者的口腔护理提供新思路和新策略。评价按照人生理时间节律特性及其生理变化规律原理,对ICU患者合理的应用冰茶灵洗剂行口腔护理的有效性和实用性,探索一种既满足ICU患者特殊性,又满足时间因素与人体生命活动节律的影响,结合冰茶灵洗剂药物的特点,突出人体生理活动变化中的生理时间昼夜节律,选择最佳合
目的：本研究通过观察骨盛汤联合小夹板外固定治疗老年患者肱骨外科颈骨折的临床治疗效果,从而探索祖国医药对于老年HSNF患者治疗的独特优势,基于老年患者天癸已去,肝肾不足的生理基础上,探寻骨折中后分期的治疗方法,以期提供更多的临床治疗选择,提升患者临床治疗的满意度。方法：收集来自我院骨科患有老年肱骨外髁颈病例60例,通过随机数字表的方法将其分为观察组（骨盛汤）和对照组（续骨活血汤）。所有骨折患者均予以
目的:通过对中药方剂治疗膝关节骨关节炎的Meta分析,回顾分析中药方剂在治疗KOA的相关文献存在的问题、评价其质量及如何完善临床RCT实验的研究方案的设计、Meta分析的实验设计提供一些借鉴及参考意义。方法:通过查阅知网（CNKI）、万方（Wangfang）、维普（VIP）、国家科技图书文献中心（NSTL）4大中文数据库,Pubmed、Cochrane Library（循证生物医学图书馆）、Emb
目的:观察艾灸结合西药对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心功能、血清NT-pro BNP、心肌组织病理形态、心肌细胞凋亡率及线粒体凋亡相关蛋白细胞色素c（Cyt-C）、凋亡诱导因子（AIF）表达水平的影响,探讨艾灸结合西药对慢性心力衰竭（CHF）可能发挥的作用机制。方法:将65只SPF级健康成年雄性SD大鼠随机分为13笼,5只/笼,给动物编号后,根据随机数表法随机选取10只（2笼）大鼠为正常组,55只（
实验目的:通过对全髋关节置换术后的患者应用补阳还五汤加味,探究其对患者术后血液高凝状态的影响以及其作用机制和安全性,为临床中西联合用药预防全髋关节置换术后下肢深静脉血栓形成提供新的方法和临床依据。实验方法:选择2019年5月-2020年8月于我院骨科住院部拟行初次全髋关节置换术的患者80例,按照随机数字表法随机分成联合组和对照组。两组手术均有科室内同一组手术医生操作,均采用全身麻醉的麻醉方法。对照
实验目的:通过盐酸甲氧氯普胺注射液建立高泌乳素诱导的乳腺导管扩张SD大鼠动物模型,探讨中药丹参化瘀汤对高泌乳素状态下乳腺导管扩张大鼠血清T淋巴细胞及免疫球蛋白水平影响;探讨其作用机制,以期指导临床应用。实验方法:50只雌性未孕SD大鼠以通用鼠料及自来水饲养一星期,随机分为5组10笼,每笼5只,分别标记为空白对照组、模型组、低剂量中药组、中剂量中药组和高剂量中药组,空白组10只SD大鼠予以正常饮食,
目的以“气血—脑髓”相关的中医理论为基础,在课题组前期应用益气活血通络法对局灶性脑缺血/再灌注（MCAO/R）大鼠神经可塑性的研究基础之上,选用益气活血通络法及其代表方脑络欣通对局灶性脑缺血/再灌注（MCAO/R）模型大鼠进行给药干预治疗,观察给药14d后MCAO/R大鼠学习记忆能力及动态观察给药后3d、7d、14d局灶性脑缺血/再灌注（MCAO/R）模型大鼠缺血侧海马CA4区GluR1、Ca M
目的基于首批云南省省级名中医李永康教授总结得出的旋前挤压手法,针对伸直型桡骨远端骨折的损伤机制;通过分析逆创伤机制复位纠正不同程度背侧、桡侧及旋后移位时,旋前挤压动作的必要性;旋前挤压手法在骨折复位过程中的力学作用机制;使用旋前挤手法整复该骨折类型的临床疗效;明确旋前挤压手法的作用机制。方法通过以下三种方法分别进行研究。德尔菲专家咨询法:查阅相关资料结合临床实际及课题组专家成员在使用旋前挤压手法过
【目的】基于失禁相关性皮炎（Incontinence-associated dermatitis,IAD）结构化皮肤护理方案,用盐酸黄连素油和造口粉联合皮肤保护膜作对比,第一用于大便失禁（Fecal incontinence,FI）患者预防IAD,观察IAD的发生率;第二用于治疗FI所致的轻度IAD患者,观察治疗的总有效率;对比两种皮肤保护剂用于预防IAD及治疗轻度IAD的材料成本及护理时间。【方