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重楼（Paris）属于百合科（Liliaceae）植物,分布广泛,全世界共有24种。我国种类最为丰富,目前发现共有19种10余个变种,在四川、贵州、云南等西南地区均有分布。重楼是一味从古沿用至今的中药,在夺命汤（《外科全生集》）、重台草散（《圣惠方》）、宫血宁胶囊、季德胜蛇药片、云南白药、重楼解毒酊、七参连软膏、楼莲胶囊、金康口服液等古方和中成药中均含有重楼。重楼的性味、功效及生长习性在最早的官方药典《新修本草》中有详细记录。重楼多以根茎入药,寒凉之性,具有清热解毒、消肿止痛、凉肝定惊等功效。近些年来,从重楼属植物中分离得到多种化学成分,包括生物碱类、黄酮类和皂苷类等。现代药理学研究表明,皂苷类成分是重楼的主要活性成分,具有抗肿瘤、抗炎、抑菌、凝血、抗病毒、提高免疫功力等多种作用,特别是其抗肿瘤活性显著,得到了广泛的关注。但是,由于重楼具有多方面的功效,且临床疗效显著,导致市场对重楼的需求量大幅增涨。近年来,大量的疯狂无序采挖致使野生重楼到了濒临灭绝的境地。因此,急需对重楼的药效物质基础及作用机制进行科学和系统的研究。巴山重楼(Paris 是重楼属的一个种,同时也是我国特有的种,具有止痛、清除解毒、消肿、利咽等多种功效。而且它是土家族（毕兹卡）的民族传统药,在跌打损伤、蛇咬伤等疾病的治疗中应用广泛,主要分布在湖北、四川和重庆等地。我们前期对采自陕南（大巴山北侧腹地,东经109°11′～109°38′、北纬31°42′～32°13′）的巴山重楼进行提取分离预实验,结果显示其含有丰富的皂苷类化学成分,得率为5.3%。并且用CCK-8法检测了提取到的总皂苷的抗胶质瘤活性,结果显示总皂苷对脑胶质瘤细胞系U87、U251、LN229和SHG44以及耐替莫唑胺胶质瘤细胞系U87R和SHG44R均具有不同程度的生长抑制作用。以上预实验结果表明,巴山重楼中的皂苷类成分具有进一步的研究价值。因此,本课题选取巴山重楼作为研究对象,对其正丁醇萃取部分进行系统的提取分离以及单体化合物的结构鉴定,并对所得单体化合物的抗胶质瘤活性及构效关系进行初步探讨,从而为巴山重楼合理的开发利用提供科学依据。采自陕西省安康市镇坪县的巴山重楼干燥根茎0.8 kg,用70%的乙醇进行加热回流提取,提取液减压浓缩后均匀分散在水中,依次用石油醚和水饱和正丁醇对其进行反复萃取。然后采用多种现代色谱分离技术对水饱和正丁醇层进行反复的分离纯化,应用波谱技术结合化学手段对分离得到的20个单体化合物进行结构鉴定。它们的结构分别是:（25R）-螺甾-5-烯-3β,7α-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）]-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷（1）、dioscoreside E（2）、lycianthoside A（3）、methylprotodioscin（4）、（25R）-螺甾-5-烯-3β,7α-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-[α-L—吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、borassosideE（6）、（25R）-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3β,26-二羟基-22α-甲氧基-5α-呋甾-6-酮-3-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-（1→6）-β-D-吡喃葡萄糖苷（7）、allimacrosideE（8）,（25R）-螺甾-5-烯-3β,7α-二醇-3-O-α-L-阿拉伯糖基-（1→4）-[α-L—吡喃鼠李糖基-（1→2）]-β-D—吡喃葡萄糖苷（9）、icogenin 1（10）、（25R）-螺甾-5-烯-3β-醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）—α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）—β-D-吡喃葡萄糖苷（11）、（25R）-26-0-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾-5-烯-22α-甲氧基-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→3）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→3）-[β-D-吡喃葡萄糖基-（1→4）]-α-L-吡喃鼠李糖苷（12）、zingiberenoside B（13）、（25R）-26-0-β-D-吡喃葡萄糖基-呋甾-5,20（22）-二烯-15α-甲氧基-3β,26-二醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）[α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）]—β-D-吡喃葡萄糖苷（14）、cesdiurin Ⅱ（15）、（25R）-螺甾-5-烯-3β,7α,12α-三醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→4）-β-D-吡喃葡萄糖苷（16）、polyphyllin Ⅵ（17）、（25R）-螺甾-3β,5α,6β-三醇-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（18）、20-hydroxyecdysone（19）、deoxyintegristeroneA（20）。其中,1-18是甾体皂苷类化合物,19-20为蜕皮激素类化合物;1为新化合物,2～18和20均首次从巴山重楼中分离得到。采用CCK-8法筛选从巴山重楼根茎正丁醇提取物中分离得到的18个甾体皂苷类化合物对人恶性胶质瘤细胞U87、U251、LN229和SHG44以及耐替莫唑胺胶质瘤细胞U87R和SHG44R的细胞毒性活性。实验结果表明,有11个化合物对胶质瘤细胞具有不同程度的抑制作用,其中化合物5、6、9和11对六种胶质瘤细胞均表现出了显著的细胞毒性,其IC50值在1.98～52.20μM之间。初步的构效关系分析表明:所分离得到的螺甾烷型甾体皂苷的抗肿瘤活性整体强于呋甾烷类,且呋甾烷类活性极弱;苷元为螺甾烷型甾体皂苷且仅在C-3成苷,糖链中糖基数为3时活性最强,当糖基数为4时活性降低,少于3个单糖时几乎没有活性;从总体来看,具有活性的单体化合物对于耐药细胞株U87R和SHG44R表现出的活性弱于非耐药细胞。