目的:观察黄芪多糖（APS）对黑色素瘤干细胞（MSCs）自我更新的作用,进一步研究其可能的作用机制。方法:在体外实验中我们选用无血清富集培养及免疫磁珠分选的方式从A375和B16-F10中筛选出MSCs,采用q RT-PCR及Western Blot检测MSCs标志物ALDH1A3、CD133及干细胞核转录因子SOX2、OCT4、Nanog m RNA及蛋白的表达水平,验证MSCs体外培养体系的建立。用100μg/m L、200μg/m L的APS进行干预,检测APS对MSCs球落形成能力、MSCs标志物、干细胞核转录因子表达水平的影响,在体外观察APS对MSCs自我更新的调控作用。接下来为了进一步探讨APS在体外调控MSCs自我更新的分子机制,用q RT-PCR及Western Blot检测了Notch1信号通路关键分子Notch1、NICD1、Jagged1、Hes1的表达水平。在体内实验中,将NOD/SCID小鼠分为四组:正常组、模型组、低浓度APS组（200mg/kg/day）、高浓度APS组（400 mg/kg/day）。将CD133+A375注入小鼠右腋部,建立动物模型。从造模之日起,APS组每日给予灌胃治疗,干预5周,定期检测小鼠体重、肿瘤体积,干预结束后处死小鼠,取出肿瘤组织,称取瘤重,进行统计学分析,探讨APS对荷瘤小鼠的治疗作用。检测肿瘤组织中MSCs标志物CD133及干细胞核转录因子SOX2、OCT4、Nanog的表达水平,探讨APS在体内对MSCs自我更新的调控作用。同时,检测肿瘤组织中Notch1信号通路关键分子的表达水平,探讨APS在体内调控MSCs自我更新的分子机制。结果:在体外实验中,首先用无血清富集培养法及免疫磁珠分选MSCs,建立MSCs的体外培养体系。用APS作用于MSCs后,球落形成实验结果显示,APS可以抑制MSCs的球落形成数量及体积。q RT-PCR及Western Blot显示:与对照组相比,APS可降低MSCs表面标志物ALDH1A3、CD133及干细胞核转录因子SOX2、OCT4、Nanog的表达,提示APS可抑制MSCs自我更新。进一步研究表明,与对照组相比,APS干预组的Notch1信号通路关键分子Notch1、NICD1、Jagged1、Hes1的表达受到抑制,差异有统计学意义。在体内实验中,APS处理组的平均肿瘤重量及体积显著小于对照组,且高浓度APS组皮下移植瘤的平均重量及体积低于低浓度APS组。同时,与模型组相比,APS能抑制肿瘤组织中CD133、SOX2、OCT4、Nanog的表达,差异有统计学意义,提示APS可通过抑制MSCs自我更新起到抗肿瘤的作用。进一步研究表明,与模型组相比,APS能抑制肿瘤组织中Notch1信号通路关键分子Notch1、NICD1、Jagged1、Hes1的表达,差异有统计学意义,表明APS在体内调控MSCs自我更新的作用机制可能与抑制Notch1信号通路的激活有关。结论:在体外实验中,APS可抑制MSCs球落形成能力及标志物的表达,表明APS可在体外抑制MSCs自我更新。在体内实验中,APS可抑制黑色素瘤荷瘤小鼠肿瘤生长及MSCs标志物的表达,表明APS可通过抑制荷瘤小鼠肿瘤组织中MSCs的自我更新,起到抗肿瘤的作用。体内外实验显示Notch1信号通路可能是APS抑制MSCs自我更新的分子机制之一。