疫苗被认为是有史以来对人类健康贡献最大的医疗技术,除了针对传染性疾病的预防性疫苗,近来针对非传染性疾病的治疗性疫苗也取得了积极性进展。从传统的灭活或减毒疫苗一直到化学结构越来越单一、明确的多肽疫苗,疫苗的安全性、专一性、有效性不断得到提高。多肽疫苗的设计原理在于,含有B细胞表位的T细胞依赖性抗原肽段能产生体液免疫的前提是,该肽段必须与外源性T表位（载体蛋白提供）同时被免疫细胞识别。由此产生的一个问题就是载体蛋白引起的载体表位抑制效应（carrier induced epitopic suppression,CIES）。CIES的具体原理至今未阐明,但如今公认的机制主要是,处于免疫优势地位的载体蛋白被免疫系统优先识别、递呈,产生高滴度的载体蛋白抗体,这大量“无效”抗体又会优先与载体蛋白结合,从而在空间上阻碍肽段表位特异性B细胞与肽段结合。这启发我们如何尽可能地减少机体对载体蛋白的免疫识别、增强对肽段的免疫应答水平,减弱甚至消除CIES的影响。目的:研制一种纳米疫苗,其中无免疫原性的白蛋白（SA）作为纳米颗粒主要骨架,载体蛋白（KLH）分布在内,抗原表位短肽(PCSK9207-223)偶联在外,空间上有序分布,验证这种疫苗对载体蛋白和抗原表位抗体滴度水平的影响,并探讨其中可能的免疫学机制。方法:选用三种白蛋白（BSA、MSA、HSA）进行系统地探索,通过“还原-热聚-氧化”法使BSA与KLH形成混合蛋白纳米载体。在体外,首先测定这些纳米载体的理化性质（粒径、电位、形貌）、形成机理、细胞毒性、稳定性、细胞吞噬效率、还原敏感性以及对免疫细胞的诱导成熟能力。在体内,先用BSA进行初步验证,摸索尽可能减少KLH暴露的粒径,并在该粒径水平上,外接PCSK9短肽,形成“分域”纳米疫苗,以分子偶联疫苗（KP）作为对照。然后用对小鼠而言无免疫原性的MSA来摸索合适的投料比以尽可能减少KLH的暴露,皮下三点免疫,免疫及采血频率为1次/周,ELISA测小鼠血清中抗KLH抗体及抗PCSK9抗体的水平。流式细胞术评价免疫后小鼠淋巴结树突状细胞（DC）、脾脏CD4+T细胞的活化情况、适应性免疫应答情况来初步探讨其有效提高抗原肽段免疫应答水平的可能机制。结果:成功合成了BSA、MSA、HSA与KLH的混合纳米载体BKN、MKN、HKN,以及“分域”纳米疫苗BKPN、MKPN、HKPN,粒径均在70 nm左右,电位在-14～-18m V,呈球形样形貌,主要作用力为二硫键,具有优越的生物相容性,体外120 h内保持稳定,易被DC 2.4吞噬（P＜0.05）,对胞内浓度水平（10m M）的谷胱甘肽具有还原敏感性。在70 nm水平、高投料比（SA:KLH=7:1）的情况下,SA可有效减少KLH的免疫识别,使抗KLH抗体几乎检测不到,同时,PCSK9的抗体滴度呈现出逐渐增加甚至在45天显著超过分子疫苗的结果。结论:SA与载体蛋白在一定粒径以及投料比情况下形成的纳米载体可以有效避免KLH的免疫识别,极大地降低抗载体蛋白的抗体水平,最终提高抗原肽段的免疫应答水平,很大程度上得益于对CIES效应的削弱作用。该疫苗设计有望对降血脂疫苗提供新策略,而且有望为解决一般短肽疫苗普遍存在的CIES难题提供新思路。