Characterization,Expression Profiles and Immune Response of Tim Genes in Medaka(Oryzias Latipes)

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甲型肝炎病毒细胞受体(Havcr)也称为T细胞免疫球蛋白和粘蛋白结构域(Tim)基因,其在细胞生物过程如细胞凋亡中起作用,并在调节过敏性疾病、自身免疫和恒温调节等免疫反应中起作用。此外,Tim家族成员可以应对病毒感染。Tim家族最初在非洲绿猴中发现。小鼠Tim家族包括8名成员(Tim-1到Tim-8),位于11号染色体上。人类Tim家族的Havc1(Tim-1),Havcr2(Tim-3)和Tim-4位于5号染色体上。在斑马鱼中,Tim-1和Tim-4在T细胞的发育中表现出它们的保守角色。虽然Tim家族在脊椎动物中有重要的作用,但至今还没有青鳉中Tim基因的相关研究。本论文中,我们首先使用生物信息学分析鉴定了青鳉Tim家族成员,再用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、实时定量PCR和整体原位杂交研究其表达情况。使用免疫刺激剂LPS和polyI:C进行腹腔注射,研究了它们的免疫反应。青鳉Tim家族的三个成员(Havcr1,Havcr2和Tim-4)都位于14号染色体上,分别编码青鳉OlHavcr1,OlHavcr2和OlTim-4蛋白。它们具有Tim蛋白常见的主要特征。与其他同源物不同,OlHavcr2和OlTim-4具有两个Ig样结构域,并缺少跨膜结构域和细胞质区域,这表明它们是从细胞分泌并位于细胞表面的细胞外蛋白质。在胚胎发育期间,OlHavcr1、OlHavcr2到OlTim-4是合子基因。其表达从原肠胚阶段开始,直到胚胎孵化。这些基因在青鳉成鱼的所有组织中都有表达,表明OlHavcr1,OlHavcr2和OlTim-4在青鳉成鱼中可能具有多种的作用。有趣的是,结果显示OlHavcr1,OlHavcr2和OlTim-4对LPS和polyI:C的刺激有反应,这表明这些基因可能参与了青鳉的免疫过程。在青鳉中发现了Tim基因,但仍需进一步的研究来阐明Tim基因在青鳉中的作用机制。
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