【摘 要】
：
抗生素广泛和不合理使用导致了全球范围内细菌耐药性的日益严重,难以或无法治疗的耐药性细菌变得越来越普遍,并引起全球性的健康危机。研究者们普遍认为抗生素耐药基因的水平转移主要是质粒介导的,然而随着全基因组测序的快速发展,越来越多的研究发现噬菌体在介导微生物与环境之间耐药基因水平转移的能力被大大低估。我们前期研究表明分离自屠宰肉的沙门菌中P1噬菌体整合了blaCTX-M-27基因(P1-blaCTX-M
【基金项目】
：
国家自然科学基金（31972734）； 华南农业大学国际科技合作重大项目专项（2019SCAUGH02）；
论文部分内容阅读
抗生素广泛和不合理使用导致了全球范围内细菌耐药性的日益严重,难以或无法治疗的耐药性细菌变得越来越普遍,并引起全球性的健康危机。研究者们普遍认为抗生素耐药基因的水平转移主要是质粒介导的,然而随着全基因组测序的快速发展,越来越多的研究发现噬菌体在介导微生物与环境之间耐药基因水平转移的能力被大大低估。我们前期研究表明分离自屠宰肉的沙门菌中P1噬菌体整合了blaCTX-M-27基因(P1-blaCTX-M-27噬菌体)进行扩散可能是造成blaCTX-M-27传播的主要原因。本研究调查了近十年来分离自养殖场及屠宰肉沙门菌中P1噬菌体的流行特征,探讨P1-blaCTX-M-27噬菌体的生物学特性及传播能力。本研究中对2009年至2019年期间实验室分离保存的1352株食品动物源沙门菌,扩增P1噬菌体标志性基因rep L来调查P1噬菌体的流行。共检出携带P1噬菌体的菌株86株（6.36%）。P1噬菌体菌株血清型鉴定结果显示优势血清型为印第安纳型。从中挑选了61株携带P1噬菌体的非克隆菌株进行药敏试验。药敏试验的结果显示,菌株对头孢菌素类的头孢噻肟、头孢曲松耐药率最高,均达到了67.2%,其中携带P1-blaCTX-M-27噬菌体菌株占耐药菌株的36.6%,均对头孢菌素类药物耐药;携带P1噬菌体菌株对环丙沙星的耐药率也相对较高,为60.7%;对于其他的抗生素,如多黏菌素E、磷霉素和替加环素等,表现出的耐药性较低甚至敏感。携带P1噬菌体菌株中过半数（50.8%）的菌株显示出多重耐药性。与不携带P1噬菌体的菌株比较,携带P1噬菌体的菌株具有更高的耐药率（头孢噻肟高约25%,环丙沙星高16.2%）。通过使用不同浓度丝裂霉素C诱导携带P1-blaCTX-M-27噬菌体沙门菌J46,确定其最佳诱导浓度为2μg/m L,最佳诱导时间为14小时。在最佳条件下诱导富集大量P1-blaCTX-M-27噬菌体后,在透射电镜下观察噬菌体形态,其头部呈二十面体,有一条可收缩性尾,可形成不规则的,直径约2～3 mm的稍有不透亮的噬菌斑。并使用该噬菌体液对200株沙门菌和大肠杆菌进行转导实验。获得6株沙门菌转导子和4株大肠杆菌转导子。沙门菌的6株转导子中,其中四株转导子是直接获得了P1-blaCTX-M-27噬菌体;另外两株原菌本身携带P1噬菌体,但转导后原噬菌体消失了,通过转导获得了P1-blaCTX-M-27噬菌体;大肠杆菌的4株转导子也都获得P1-blaCTX-M-27噬菌体。说明P1-blaCTX-M-27噬菌体可以在大肠杆菌和沙门菌中进行转导传播,沙门菌转导效率略高于大肠杆菌。对转导子进行了药敏试验,药敏试验的结果显示出,受体大肠杆菌和受体沙门菌转导之后都仅获得了头孢菌素类药物抗性,值得注意的是沙门菌转导子MIC值要高于大肠杆菌转导子MIC值（高出1～2倍）。对携带P1-blaCTX-M-27噬菌体的大肠杆菌和沙门菌转导子在没有药物压力的条件下进行30天的稳定性试验,结果表明转导后的P1-blaCTX-M-27噬菌体均稳定存在。综上所述,含有P1噬菌体的沙门菌常呈现出多药耐药的现象,对头孢菌素类抗生素耐药性最为严重,并且比不含有P1噬菌体的沙门菌耐药率高。P1噬菌体在印第安纳型沙门菌中最为常见,且携带P1-blaCTX-M-27噬菌体的菌株均为印第安纳型。P1-blaCTX-M-27噬菌体可在大肠杆菌和沙门菌中进行转导传播,对耐药基因的水平转移起到作用。
其他文献
猪流行性腹泻病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）是猪流行性腹泻（Porcine epidemic diarrhea,PED）的病原,PED主要引起高度传染性肠道疾病,受感染猪的肠上皮绒毛萎缩、腹泻、脱水和食欲下降,哺乳仔猪有极高死亡率,一直影响并困扰着全世界养猪业的发展,而且造成养猪业的巨大经济损失。冠状病毒的受体相互作用是由形成冠状病毒包膜上特有的大尖
自噬是生物体细胞内发生的一种自我调节机制,细胞通过自噬降解胞内的大分子物质或者损坏的细胞器,使细胞内的物质发生有序的降解、回收再利用。溶酶体长期以来一直被视为细胞的回收中心,近年来的研究还确立了溶酶体在营养依赖性信号转导中的核心作用。溶酶体功能的发挥主要是依赖其内部环境的酸化以及溶酶体内大量的蛋白水解酶的激活。液泡型H+-腺苷三磷酸酶（V-ATPase）对于溶酶体的酸化是必不可少的,并且参与自噬过
细胞自噬（Autophagy）能够捕获并降解细菌、病毒等多种病原体,被认为是先天免疫的一个重要组成部分。然而很多病毒在长期进化中,演变出多种机制来逃避宿主的免疫或者利用细胞自噬进行自我复制。我们研究发现苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒（Autographa californic multiple nucleopolyhedrovirus,AcMNPV）感染鳞翅目昆虫草地贪夜蛾（Spodoptera fr
先天免疫是动物应对微生物侵染的重要防御机制之一。昆虫因没有特异性免疫的存在,先天免疫在昆虫抵御外来微生物等入侵中发挥至关重要的作用。鸡肠炎血清型沙门氏杆菌（Salmonella enterica）具有较广的宿主谱,除了侵染鸡形目外,还可以在高等哺乳动物中传播。然而,它在易感宿主中具有较强的致病性,容易造成宿主的病变甚至死亡,不利研究宿主的防御机制。因此需要引入一个中介模型以克服其中的弊端,而果蝇已
随着全球气候变暖,夏季高温对鸡养殖的威胁越来越严重。热应激是目前影响全球集约化和集约化系统中家禽生产力和福利的主要环境应激因素之一,并且热应激是严重影响家禽业环境应激源之一,对动物健康、生产力和产品质量都有极大的负面影响。家禽的体温、耐热性和经济性之间有不可分割的作用,三者具有很强的负相关关系。热应激会导致鸡生长速度降低,饲料转化率降低,同时会使机体免疫反应受损,最终导致鸡肉质下降,还会导致动物福
随着人们膳食结构的不断改变以及生活水平的不断提高,造成越来越多的人群出现肥胖,肥胖已成为一种全球性的“流行病”。肥胖往往伴随全身的低水平炎症反应,并诱导机体出现胰岛素抵抗。在2型糖尿病的发生、发展过程中胰岛素抵抗作为重要的发病因素与其有着密切的联系。胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍是2型糖尿病的两大病理生理特征。机体组织（脂肪、肝脏、肌肉等组织）产生胰岛素抵抗时,细胞摄取和利用葡萄糖能力下降,从而引
猪体细胞核移植（Somatic cell nuclear transfer,SCNT）技术在农业动物的育种与保种、拯救濒危动物、生物医学及医药上有着重要的应用价值。然而,当前SCNT猪的出生效率仅有1%左右。低克隆效率严重限制了猪SCNT技术的推广与应用。研究发现,SCNT胚胎的发育异常是由于其基因组不完全重编程导致的。在早期克隆胚胎的发育过程中,其基因组的重编程以及分化主要依赖卵母细胞在成熟过程
猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea virus,PED）是由猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的急性、传染性胃肠道疾病,临床上可导致猪只严重腹泻、呕吐和脱水,并且对十日龄以内的仔猪致死率高达100%,给各国生猪养殖行业均造成了巨大经济损失和生产困难。猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种有囊膜包被的单股正链RN
猪圆环病毒2型（PCV2）感染引起的疾病称为猪圆环病毒相关疾病,主要包括断奶仔猪多系统衰竭综合征、猪皮炎与肾病综合征与生殖系统疾病,给全球养猪业造成了巨大的压力与经济损失。G3BP1（GTPase-activating protein SH3 domain-binding protein1）在宿主抵抗病毒感染过程中起着重要作用,但未见宿主蛋白G3BP1在PCV2（Porcine cicroviru
胚胎着床与蜕膜化在早期妊娠中的作用非常重要。甲状腺激素属于下丘脑-垂体-甲状腺轴中重要的激素,在机体发育、新陈代谢以及生殖系统具有极其重要的作用。在人和啮齿类动物的子宫中,甲状腺激素受体（Thyroid hormone receptor,THR）和脱碘酶（Deiodinase,DIO）等与甲状腺激素相关的基因均有表达,并在妊娠时期发挥特定的作用。然而。甲状腺功能紊乱对于生殖的影响也越来越受到重视。