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目的:观察不同病变程度的人OA关节软骨中软骨细胞Fas的表达情况，并探讨人软骨中Fas的表达与软骨退变严重程度之间可能存在的关系;探索重组OPN对人膝关节OA软骨细胞Fas表达及细胞凋亡的影响，为OA的防治提供新的思路。 方法:选取25例行全膝人工关节置换术OA患者的软骨标本，7例正常软骨标本来自年轻健康患者车祸意外行截肢术后。将各软骨标本采用常规HE染色，参照Freemont分度法将软骨退变分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度。应用免疫组织化学染色法检测软骨标本中Fas的表达情况。 从人OA软骨标本和正常软骨标本分离并培养软骨细胞，将正常软骨细胞组（A组）予以溶媒干预作对照，OA软骨细胞分为B、C、D三组，分别予以溶媒、OPN siRNA基因干扰和人重组OPN进行干预;设计合成OPN siRNA并转染人OA软骨细胞，检测其转染效率及转染人OA软骨细胞后细胞OPN的表达水平;各组软骨细胞在接受干预前，共同孵育24小时，干预48小时后，分别应用免疫细胞化学染色(ICC staining)、Western blotting及qRT-PCR检测各组软骨细胞Fas蛋白及mRNA表达水平;同时应用MTT、AnnexinⅤ-FITC&PI凋亡检测及TUNEL检测各组软骨细胞凋亡情况。 结果:1、实验组OA软骨标本大体观察及HE染色镜下观察结果显示OA软骨退变较正常软骨明显严重。2、Fas免疫组化染色示正常软骨中Fas染色阳性的细胞较少，且主要集中于软骨的表层和中层;而OA软骨的软骨表层、中层和深层均有软骨细胞被染成黄色或黄棕色，OA软骨细胞Fas表达阳性率较高。3、OPN siRNA通过LipofectamineTM2000可顺利转染人OA软骨细胞，转染率大于90％，且转染OA软骨细胞48小时后细胞OPN蛋白表达水平下降71.6％。4、ICC染色显示A组和C组细胞染色较浅，细胞核呈蓝紫色，细胞质/膜被均匀地染成蓝灰色，而B组细胞与A组和C组比较则染色较深，细胞核为蓝色，细胞质/膜被染成黄色，D组细胞染色较B组进一步加深，细胞质/膜被染成棕黄色。5、WesternBlotting检测A、B、C、D各组软骨细胞的Fas蛋白表达结果分别为: A组81.710±4.3799， B组143.811±15.7128， C组53.893±3.0975，D组182.204±22.1973，B组与A组比较软骨细胞Fas蛋白表达存在显著差异(p=0.01，p＜0.05)，C组与B组比较(p=0.001)以及D组与B组比较(p=0.009)也均存在显著差异(p＜0.05);应用qRT-PCR检测A、B、C、D各组软骨细胞FasmRNA的表达结果分别为:A组1.390±0.2422，B组3.919±0.2919，C组1.106±0.1256，D组4.613±0.1315，B组与A组(p=0.001)比较软骨细胞Fas mRNA表达存在显著差异(p＜0.05)，C组与B组比较(p=0.001)以及D组与B组比较(p=0.004)也均存在显著差异(p＜0.05)。6、MTT法检测结果显示:以A组正常软骨细胞作为对照（存活率100％），B、C、D各组的软骨细胞存活率分别为:B组93.5％，C组99.4％，D组81.9％; AnnexinⅤ-FITC&PI凋亡检测A、B、C、D各组软骨细胞早期凋亡率结果为:A组1.420±0.1778％，B组8.710±0.1588％，C组4.057±0.2055％，D组17.950±0.8324％，各组的总凋亡率分别为:A组3.763±0.1331％，B组12.473±0.2318％，C组6.663±0.2479％，D组21.257±0.1950％，B组软骨细胞与A组软骨细胞的早期凋亡率和总凋亡率均存在显著差异（p值均为0.001，p＜0.05），C组与B组比较（p值均为0.006）以及D组与B组(p值均为0.006)比较软骨细胞早期凋亡率和总凋亡率也均存在显著差异(p＜0.05);TUNEL法检测A、B、C、D各组软骨细胞凋亡率分别为:A组4.050±1.0204％， B组14.333±1.5275％，C组8.105±1.0342％，D组22.401±2.4815％，B组软骨细胞与A组软骨细胞凋亡率存在显著差异(p=0.001，p＜0.05)，C组与B组比较(p=0.006)以及D组与B组(p=0.006)比较软骨细胞凋亡率存在显著差异(p＜0.05)。 结论:1、OA软骨细胞的Fas表达水平和软骨细胞凋亡率均较正常软骨细胞显著增高。2、OA软骨中Fas蛋白的高表达可能与OA软骨损伤有关。3、重组OPN可以增强OA软骨细胞Fas表达和软骨细胞凋亡。4、OPN siRNA可以抑制OA软骨细胞Fas表达和软骨细胞凋亡。